Fe3O4納米磁流體熱療增加鼻咽癌CNE-2細胞、大細胞肺癌H460細胞放療敏感性的研究.pdf

1、目的：合成水溶性、穩(wěn)定性好的Fe3O4納米團簇磁流體，探討該納米磁流體在交變磁場的作用下熱療的效果，對放射治療的協(xié)同增敏作用以及可能的機制。
　　方法：用多元醇法制備出水溶性和穩(wěn)定性均較好的Fe3O4納米團簇磁流體，通過TEM、XRD、FTIR、VSM、TGA等方法對Fe3O4磁納米顆粒進行表征；紅外線測溫儀測量不同濃度的Fe3O4磁流體在交變磁場下升溫情況；細胞水平上，以低分化人鼻咽癌細胞系CNE-2和人大細胞肺癌細胞系H460

2、為實驗對象，CLSM、倒置顯微鏡、以及TEM觀察細胞對納米粒的攝取情況；MTT檢測該納米顆粒的生物相容性及納米磁流體熱療、放療和熱療聯(lián)合放療對細胞增殖的影響；流式細胞儀檢測經(jīng)過上述處理前后細胞凋亡和細胞周期分布的變化；γ-H2AX焦點實驗和克隆形成實驗檢測磁流體熱療是否有放療增敏效果；Western Blot實驗檢測在磁流體熱療、放療、熱療聯(lián)合放療后熱休克蛋白70（HSP70）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表達情況

3、。在動物水平上，建立人大細胞肺癌（H460）裸鼠皮下移植瘤模型，繪制腫瘤生長曲線，探討磁流體熱療聯(lián)合放療對腫瘤生長的影響。
　　結(jié)果：成功合成出水溶性和穩(wěn)定性較好，粒徑在50-60nm之間、粒徑較均勻、形態(tài)呈圓形或類圓形的納米顆粒團簇。通過XRD、FTIR、TGA等檢測方法可證實合成的為Fe3O4納米顆粒，并且PAA的羧基螯合在Fe3O4表面，通過VSM及XRD證明Fe3O4為超順磁性納米顆粒，飽和磁化強度為13emu/g，平均粒

4、徑為7.33nm；不同濃度的磁流體（200μg/mL-2mg/mL）在交變磁場作用下1h，溫度均能快速地上升，且有濃度依賴性：濃度越高，溫度上升越高、上升速率越快,40-45min后溫度保持恒定；納米顆?？杀患毎淌?，分布在細胞質(zhì)中，圍繞在細胞核的周圍；Fe3O4有較好的生物相容性；磁流體熱療，放療4Gy,磁流體熱療聯(lián)合放療的作用下，CNE-2細胞系增殖抑制率分別為30％、29％、38％，H460細胞系增殖抑制率分別為25％、27％、4

5、3％；流式細胞儀檢測在磁流體熱療、放療，磁流體熱療聯(lián)合放療作用下，CNE-2細胞凋亡率分別為19.04％、12.91％、28.94％，H460細胞系凋亡率分別為15.52％、10.21％、23.56％；在熱療和熱療聯(lián)合放療的作用下，S期細胞增加，經(jīng)過放療，G2期增加；熱療、放療及熱療聯(lián)合放療均可引起HSP70蛋白、Caspase-3(分子量35KDa)蛋白的表達增加，其中熱療聯(lián)合放療組增加最明顯；放療前1h磁流體熱療具有放射增敏作用，C

6、NE-2、H460細胞系放射增敏比分別為1.19和1.16；在體外實驗中，磁流體熱療組、放療組、熱療聯(lián)合放療的抑瘤率分別為49％、46％、80％，聯(lián)合組明顯抑制了腫瘤的生長（P<0.05）。
　　結(jié)論：1.用多元醇法可以成功合成出生物相容性好，水溶性和穩(wěn)定性佳的Fe3O4超順磁性納米磁流體；2.該納米磁流體在交變磁場作用下可以升溫，實現(xiàn)熱療作用，對人鼻咽癌CNE-2細胞系和人大細胞肺癌H460以及人大細胞肺癌裸鼠移植瘤具有放療增敏