克班寧抗心肌缺血的實驗研究及一般藥理學研究.pdf

1、云南昆明 650200克班寧(Crebanin,Cre)主要存在于防己科千金藤屬(Stephania,Ste)的部分植物中,屬異喹啉類阿樸菲型(aporphine)生物堿。對Cre的前期研究表明：Cre為單體,有效成分明確,藥效學顯示Cre具有多種藥理活性<'[1-4]>,靜脈給藥能降低結(jié)扎大鼠冠狀動脈所致心律失常發(fā)生率和持續(xù)時間；能明顯地推遲大鼠心肌缺血再灌注損傷所致心律失常發(fā)生的時間,并縮短心律失常的持續(xù)時間；Cre能縮短在缺血期間

2、I/R的評分值；Cre可使心肌MDA含量明顯降低,同時使心肌組織SOD、GSH.PX活性明顯升高；能縮小心肌缺血范圍及梗死面積。本課題旨在改變給藥途徑,從抗心肌缺血的角度進一步探討克班寧對心血管的作用,探討其作為抗心肌缺血藥的可行性；同時對Cre不同給藥途徑的安全性進行評價。 目的：探討Cre口服給藥途徑的抗心肌缺血作用及可能的機制,評價不同給藥途徑的安全性,進一步開發(fā)異喹啉類化合物在心血管疾病方面的應(yīng)用。 方法：口服

3、灌胃Cre采用Bliss法求出小鼠灌胃給藥的LD50；采用皮下注射異丙腎上腺素(Iso)增加小鼠心肌耗氧,以普萘洛爾(Pro)為陽性對照,生理鹽水(NS)為陰性對照,口服給藥觀察Cre5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg三個劑量,一次給藥,及連續(xù)7天給藥對小鼠常壓耐缺氧的影響；采用異丙腎上腺素(Iso)造成急性小鼠心肌缺血模型,設(shè)立克班寧組(Cre,10mg/kg)、陽性對照組(普萘洛爾)、模型組、正常組,觀察小鼠心肌病理改變；

4、采用異丙腎上腺素所致大鼠急性心肌缺血模型,設(shè)立克班寧組(Cre,10mg/kg)、陽性對照組(普萘洛爾)、模型組,口服給藥觀察大鼠給藥前后及組間心肌缺血心電圖的變化,并在描記心電后測定大鼠血清SOD、MDA及NO的活性；采用垂體后葉素(Pit)造成大鼠急性心肌缺血模型,設(shè)立克班寧組(Cre,10mg/kg)、陽性對照組(硝酸甘油)、模型組,口服給藥觀察大鼠給藥前后及組間心肌缺血心電圖的變化,并在描記心電后測定大鼠血小板聚集率；采用靜脈給

5、藥方式,設(shè)立克班寧5mg/kg、2.5mg/kg、1.25mg/kg三個劑量組及陰性對照組(5﹪葡萄糖),觀察Cre對中樞系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)的影響。 結(jié)果： 1、Cre的急性毒性試驗：小鼠灌胃給藥后,用B1iss法求得Cre灌胃給藥途徑LDso約為70.32±0.02mg/kg,LD<,50>的95﹪可信區(qū)間為63.20～78.25mg/kg。 2、Cre對Iso增加小鼠心肌耗氧存活時間的影響:與NS組比較,普萘

6、洛爾(Pro,13mg/kg)組小鼠的耐缺氧生存時間明顯延長,經(jīng)統(tǒng)計學處理差異具有非常顯著性意義(P<0.01)；Cre高劑量(20mg/kg)1天組與NS組比較差異具有顯著性意義(P<0.05),Cre中劑量(10mg/kg)7天組0.050.05)。 3、Cre對Iso所致小鼠急性心肌缺血模型心肌細

7、胞的病理組織學影響:從病理切片來看,正常對照組心肌細胞形態(tài)正常；模型組心肌細胞水腫變性伴充血；Pro組部分心肌細胞水腫變性；Cre7天組部分心肌細胞水腫變性。 4、Cre對Iso所致急性心肌缺血模型大鼠的影響：從心電圖觀察,同模型組相比,Cre對lso造成的心肌缺血的對抗作用不明顯,雖有延緩心肌發(fā)生嚴重缺血的趨勢,經(jīng)統(tǒng)計學處理差異無顯著性意義(P>0.05)；但可以明顯推遲因缺血導致的心律失常發(fā)生時間,并減少心律失常發(fā)生率(P<

8、0.01)。 5、Cre對Iso所致急性心肌缺血模型大鼠血清SOD、MDA及No活性的影響:同模型組相比Pro組及Cre組血清中SOD活性顯著升高,經(jīng)統(tǒng)計學處理差異具有顯著性意義(P<0.05)；同模型組相比Pro組及Cfe組血清中MDA含量雖稍有下降,但經(jīng)統(tǒng)計學處理差異無顯著性意義；與模型組比較Pro組及Cre組血清中NO含量雖有升高趨勢,但經(jīng)統(tǒng)計學處理差異無顯著性意義(P>0.05)。 6、Cre對Pit所致急性心肌

9、缺血模型大鼠的影響:同模型組比較,Cre對Pil造成大鼠急性心肌缺血的對抗作用不明顯；經(jīng)統(tǒng)計學處理差異無顯著性意義(P>0.05)。 7、Cre對Pit所致急性心肌缺血模型大鼠血小板聚集的影響:同模型組比較,硝酸甘油組及Cre組大鼠血漿血小板的聚集率在統(tǒng)計學上差異無顯著性意義(P>0.05)。 8、Cre靜脈給藥對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響:同對照組比較,Cre各劑量組對小鼠的步態(tài)、肌緊張等一般行為無影響(P>0.05)；Cre

10、能計量依賴性增加小鼠翻正反射消失例數(shù),經(jīng)統(tǒng)計學處理差異具有非常顯著性意義(P<0.01)；Cre高、中劑量組能明顯減少小鼠自主活動次數(shù)(P<0.01),低劑量組自主活動雖然有減少的趨勢,經(jīng)統(tǒng)計學處理差異無顯著性意義(P>0.05)。 9、Cre靜脈給藥對大鼠心血管系統(tǒng)的影響：實驗結(jié)果表明,各組動物給藥后30秒,克班寧能明顯降低大鼠的收縮壓、舒張壓、平均動脈壓及減慢心率,與對照組相比,差異有非常顯著性意義(P<0.05,P<0.0

11、1),且在給藥后1min,只有Cre5mg/kg對大鼠的舒張壓和平均動脈壓有明顯影響,與對照組相比有顯著性意義(P<0.05),在給藥后5min、10min及20min對血壓及心率無明顯影響；對大鼠心電圖研究結(jié)果表明,在給藥20min后克班寧對實驗動物心電圖各指標都無明顯影響。 結(jié)論： 1、Cre口服給藥具有一定毒性,毒性小于靜脈給藥,LD<,50>約為70.32±0.02mg/kg,安全范圍較靜脈給藥明顯提高；

12、 2、Cre20mg/kg1次口服預防性給藥可延長Iso增加心肌耗氧小鼠的常壓耐缺氧存活時間； 3、Crelomg/kg連續(xù)7天口服預防性給藥對Iso所致急性心肌缺血小鼠的心肌細胞有一定的保護作用； 4、Crelomg/kg連續(xù)7天口服預防性給藥可減少Iso所致急性心肌缺血所引發(fā)的大鼠心律失常的發(fā)生率； 5、Crelomg/kg連續(xù)7天口服預防性給藥可提高Iso所致急性心肌缺血大鼠血清SOD活性； 6、C

13、relomg/kg連續(xù)7天口服預防性給藥對垂體后葉素所致急性心肌缺血模型大鼠心肌缺血的發(fā)生無明顯對抗作用； 7、Crelomg/kg連續(xù)7天口服預防性給藥對大鼠體內(nèi)血小板聚集無明顯影響； 8、Cre在1.25-5mg/kg劑量范圍內(nèi)靜脈給藥對小鼠的步態(tài)、肌緊張等一般行為無影響； 9、Cre在1/25-5mg/kg劑量范圍內(nèi)靜脈給藥可增強戊巴比妥鈉閾下劑量對小鼠的催眠作用,并且具有一定的鎮(zhèn)靜作用； 10、C