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文檔簡介
1、目的:
本實驗設計通過 PCR-DGGE技術對正常種植體齦溝內(nèi)優(yōu)勢微生物群落進行動態(tài)觀察。了解正常種植體周圍齦下優(yōu)勢微生物種群與正常天然鄰牙齦下優(yōu)勢菌群的差異,分析正常種植體周圍齦下優(yōu)勢微生物種群的動態(tài)變化。探討種植體周圍微生物變化對種植體周圍軟組織的影響,為種植術后臨床維護和健康干預提供參考。
方法:
利用PCR-DGGE技術,對正常種植體周齦溝液及鄰近的健康天然牙齦溝液中的微生物種群進行多樣性的比較分析
2、。收集符合實驗設計要求的種植體周齦溝液及鄰近天然牙周齦溝液,提取其中微生物DNA,進行PCR-DGGE電泳和測序并對測到的菌種進行半定量分析。
結果:
收集過程中,每個樣本量均>0.0040g,足夠提取DNA??v向對比實驗組(健康種植牙)各時間段齦溝液量(P>0.05)無明顯統(tǒng)計學差異;橫向對比實驗組(健康種植牙)與對照組(健康天然鄰牙)齦溝液量(P>0.05)也無顯著統(tǒng)計學差異。
微量樣品基因組試劑盒提取
3、到的DNA可直接用于 PCR-DGGE檢測(PCR擴增效果好,DGGE電泳圖條帶清晰)。
縱向比較:健康種植體周及天然牙周圍齦下微生物種群中,1-3個月多樣性指數(shù)波動,部分微生物物種消失或出現(xiàn),12個月時趨于穩(wěn)定。橫向比較:實驗組齦下微生物種群在1-3個月內(nèi)多樣性指數(shù)波動大于天然牙,在12個月趨于穩(wěn)定,無明顯差異,相似性指數(shù)隨時間延長而逐漸增大。
實驗組和對照組優(yōu)勢微生物群落在各時期所占相對比例相似無明顯差異,以厭氧
4、菌為主。齦下微生物種群中優(yōu)勢微生物種群為:鏈球菌屬、月牙形單胞菌屬、韋榮球菌屬、普雷沃氏菌屬等。
結論:
健康種植體及天然牙周齦下微生物種群以厭氧菌為主。發(fā)現(xiàn)有真核生物、密螺旋體等特異性微生物及牙齦卟啉單胞菌等可疑致病菌的存在,但所占相對比例較低。
1-3個月時種植體周齦下菌群處于不穩(wěn)定時期,微生物種群結構有所變化,微生物種類和分布具有多樣性,3-12個月逐漸趨于穩(wěn)定。而種植體周圍齦下微生物群落中的優(yōu)勢微生
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