脂肪組織Nlrp3炎性體改變?cè)谧汾s生長(zhǎng)胰島素抵抗形成中的作用.pdf

1、目的：通過連續(xù)動(dòng)態(tài)觀察追趕生長(zhǎng)大鼠恢復(fù)飲食前后生長(zhǎng)狀況及腎周脂肪組織體脂比,評(píng)價(jià)其系統(tǒng)胰島素敏感性變化,檢測(cè)腎周脂肪組織Nlrp3炎性體表達(dá)及血炎性標(biāo)記物的含量,初步探討Nlrp3炎性體在追趕生長(zhǎng)中的作用,揭示追趕生長(zhǎng)大鼠胰島素抵抗形成機(jī)制。
　　方法：采用體重因素隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),將6周齡雄性SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后隨機(jī)分為10組,其中5組(即追趕生長(zhǎng)組群RN)為熱卡限制組(R4)和追趕生長(zhǎng)1、2、4、8周組(R4N1、R4N2、R

2、N4、RN8);另外5組為上述5組的年齡匹配正常飲食對(duì)照組(即NC組群,分別為NC4、NC5、NC6、NC8、NC12)。通過先予熱卡限制4周后恢復(fù)正常飲食的方法建立追趕生長(zhǎng)大鼠模型。實(shí)驗(yàn)過程中記錄大鼠每日進(jìn)食量及體重變化,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)測(cè)大鼠的空腹血糖、血脂、血胰島素水平。采用稱組織濕重計(jì)算體脂百分比和雙能X線檢測(cè)兩種方法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腎周脂肪組織體脂含量,采用檢測(cè)血空腹胰島素和清醒狀態(tài)下高胰島素-正葡萄糖鉗夾實(shí)驗(yàn)來評(píng)估實(shí)驗(yàn)動(dòng)物系統(tǒng)胰島素敏

3、感性;并取腎周脂肪組織做RealTime-PCR和Western-Blot檢測(cè)Nlrp3以及Caspase-1的表達(dá),ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法檢測(cè)血清IL-1β、IL-18水平。
　　結(jié)果：
　　(1)限制飲食4周時(shí),RN組體重明顯低于NC組(P<0.05),開放飲食后,RN組大鼠體重迅速增加,其增長(zhǎng)速度明顯快于正常對(duì)照組,但直至追趕8周末RN組體重仍低于NC組。限食后RN組腎周脂肪體脂比顯著減少(P<0.05),開放

4、飲食1周、2周迅速增加后增長(zhǎng)速度逐漸減慢,但自開放飲食2周起RN組體脂比一直高于NC組(P<0.05)。
　　(2)大鼠限食后,血糖無明顯差異,開放飲食后,RN組血糖值有不同程度的升高,與NC組相比其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。限食后RN組血甘油三酯與NC組相比無明顯差異,開放飲食1周時(shí)出現(xiàn)一過性迅速增高后回落,但在開放飲食后全程RN組血甘油三酯水平一直高于NC組(P<0.05)。
　　(3)高胰島素-正糖鉗結(jié)果顯示葡

5、萄糖輸注率(GIR)在限食4周末輕度升高,兩組無顯著性差異;開放飲食后逐漸降低,于開放4周時(shí),RN組的GIR明顯低于NC組(P<0.05),出現(xiàn)系統(tǒng)胰島素敏感性受損;追趕至8周時(shí),RN組的GIR較NC組進(jìn)一步降低(P<0.01),系統(tǒng)胰島素抵抗明顯加重。
　　(4)腎周脂肪組織Nlrp3和Caspase-1的表達(dá)在限食后均明顯降低,(P<0.05),開放飲食后逐漸升高,2周末即達(dá)正常水平,4周時(shí)超過正常水平(P<0.05),于開放