中藥提取液抑制R質(zhì)粒接合傳遞的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察中藥提取液在體內(nèi)外能否有效地抑制R質(zhì)粒在S.flexneri D15R-plasmidCm<'R>和E.coll1485Rif<'R>之間的接合傳遞作用。 方法：1.六十種單味中藥經(jīng)乙醇提取制成提取液，分別測(cè)定各味中藥提取液Sflexneri D15 R-plasmid Cm<'R>和E.coll1485 Rif<'R>的最小抑菌濃度(MIC)，取兩菌共同的亞最小抑菌濃度為體外實(shí)驗(yàn)濃度。2.體內(nèi)外R質(zhì)粒接合傳遞抑制實(shí)驗(yàn)

2、：①體外篩選有效抑制R質(zhì)粒接合傳遞的藥物：中藥提取液與Sflexneri D15R-plasmid Cm<'R>和E.coll1485Rif<'R>共同培養(yǎng)24和48小時(shí)，并設(shè)立七個(gè)對(duì)照組；計(jì)算各味中藥和各對(duì)照組的R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移率和有效藥的R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移抑制率：R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移率(％)=轉(zhuǎn)移接合子數(shù)／受體菌菌落數(shù)×100％；R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移抑制率(％)=(1—藥物作用后的轉(zhuǎn)移接合子數(shù)／無藥物作用的轉(zhuǎn)移接合子數(shù))×100％。②有效藥物體內(nèi)R質(zhì)粒接合傳遞抑制實(shí)

3、驗(yàn)：2倍的有效藥物體外實(shí)驗(yàn)濃度與SfiexneriD15R-plasmidCm<'R>和E.coll1485Rif<'R>注入昆明小白鼠腹腔，作用24和48小時(shí)，并設(shè)立三個(gè)對(duì)照組，計(jì)算各味中藥和各對(duì)照組的R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移率及有效藥的R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移抑制率，計(jì)算方法同前。 結(jié)果：1.體外篩選出的有效藥物：虎杖、白頭翁、白芨、黃精、龍膽草、木香、黃連，作用后的R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移率都明顯的下降，24小時(shí)的R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移率(％)為：7.15±0.21(黃連)、

4、4.6±0.14(木香)、4.55±0.21(龍膽草)、4.15±0.78(黃精)、3.5±0.42(白芨)、2.25±0.35(白頭翁)、1.23±0.21(虎杖)，與未加藥對(duì)照組R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移率(％)：47.3±0.53有極明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.01)；48小時(shí)的R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移率(％)為：3.65±0.07(木香)、3.45±0.07(黃連)、2.9±0.14(白芨)、2.8±0.71(黃精)、2.75±0.49(龍膽草)、1.4±0.

5、14(白頭翁)、O.47±0.21(虎杖)，與未加藥對(duì)照組R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移率(％)：68.9±1.01有極明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.01)。24小時(shí)的R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移抑制率(％)為：97.4(虎杖)、95.2(白頭翁)、92.6(白芨)、91.2(黃精)、90.4(龍膽草)、90.3(木香)、84.9(黃連)，48小時(shí)的R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移抑制率(％)為：99.3(虎杖)、98(白頭翁)、95.9(黃精)、95.8(白芨)、96(龍膽草)、95(黃連)、94

6、.7(木香)。2.體內(nèi)篩選出的有效藥物：黃精和木香，作用后的R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移率都明顯的下降，24小時(shí)的R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移率(％)為：11.83±2.37(黃精)、4.17±0.59(木香)，與未加藥對(duì)照組R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移率(％)：58.67±5.8有極明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p

7、01)。24小時(shí)的R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移抑制率(％)為：96.6(木香)、79.8(黃精)，48小時(shí)的R質(zhì)粒轉(zhuǎn)移抑制率(％)為：92.9(木香)、72．9(黃精)。 結(jié)論：1.虎杖、白頭翁、白芨、黃精、龍膽草、木香、黃連在體外能有效抑制R質(zhì)粒在腸道菌S.flexneri D15 R-plasmid Cm<'R>和E.cotli1485 Rif<'R>之間接合傳遞。2.木香和黃精在體內(nèi)能有效抑制R質(zhì)粒在腸道菌Sflexneri D15 R-p