酶觸型結(jié)腸靶向吲哚美辛微丸的研制.pdf

1、目的：口服結(jié)腸定位釋藥系統(tǒng)（OCDDS）可用于結(jié)腸局部病變的治療，近年來(lái)受到廣泛重視。天然多糖類化合物作為制劑輔料應(yīng)用廣泛，因其可被結(jié)腸菌群釋放的酶特異性降解，成為結(jié)腸定位給藥系統(tǒng)的新型載體材料。海藻酸鈉是從海帶或海藻中提取的天然多糖類化合物，易溶于水，無(wú)毒，有良好的生物降解性和相容性，現(xiàn)已被大量用作藥物的緩釋和控釋材料，廣泛應(yīng)用于片劑、微丸、微囊、脂質(zhì)體、納米粒等緩釋制劑中。
　　 本實(shí)驗(yàn)以海藻酸鈉為輔料，吲哚美辛為模型藥物，

2、制備酶觸型海藻酸鈉/氯化鈣結(jié)腸靶向傳遞系統(tǒng)（enzyme triggered colon specific drug delivery System，ECDDS），可將藥物定位于結(jié)腸局部釋藥，提高局部治療濃度的同時(shí)，避免胃、小腸吸收引起刺激的副作用。
　　 方法：以海藻酸鈉作為輔料，利用海藻酸鈉與氯化鈣發(fā)生膠凝反應(yīng)，形成疏水性的海藻酸鈣骨架結(jié)構(gòu)，藥物嵌入骨架結(jié)構(gòu)中形成含藥的骨架微丸，結(jié)腸部位的特有的酶使海藻酸鈣骨架降解，釋放藥物

3、，實(shí)現(xiàn)藥物的結(jié)腸靶向作用。
　　 配制一定濃度的含藥海藻酸鈉溶液，通過(guò)滴頭將海藻酸鈉溶液滴入一定濃度的氯化鈣溶液中，形成含藥海藻酸鈣微丸。通過(guò)單因素試驗(yàn)選擇最佳的微丸制備工藝，分別對(duì)滴頭口徑、滴距、滴速、干燥溫度和干燥時(shí)間等因素進(jìn)行考察，從而確定最佳制備工藝。在單因素考察基礎(chǔ)上，通過(guò)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)篩選優(yōu)化處方，選擇氯化鈣溶液濃度、海藻酸鈉溶液濃度、氯化鈣溶液pH作為三種影響因素，每種影響因素選取兩個(gè)不同水平，按L4（23）正交試驗(yàn)

4、處方，綜合評(píng)價(jià)微丸形態(tài)和釋放度，通過(guò)級(jí)差分析和方差分析，確定微丸的最佳處方。
　　 在文獻(xiàn)報(bào)道和預(yù)試驗(yàn)基礎(chǔ)上，建立紫外分光光度法（UV）和高效液相分析方法（HPLC），測(cè)定吲哚美辛微丸的釋放度。對(duì)制成的微丸進(jìn)行釋放度考察，在參考USP23和參考文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，結(jié)合本實(shí)驗(yàn)確定釋放方法。
　　 考察高溫、高濕和強(qiáng)光照射等因素對(duì)微丸穩(wěn)定性的影響，分別于試驗(yàn)期間第5天和第10天取樣一次，觀察其性狀和測(cè)定釋放度。
　　 以大

5、鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，隨即分為兩組，在乙醚輕度麻醉下通過(guò)聚乙烯管為大鼠灌下含藥海藻酸鈉/氯化鈣微丸（實(shí)驗(yàn)組）或自制吲哚美辛混懸液（對(duì)照組）。用高效液相色譜法測(cè)定給藥后不同時(shí)間的血藥濃度，以及胃、小腸、盲腸和結(jié)腸等部位內(nèi)容物中藥物的分布情況。
　　 結(jié)果：通過(guò)對(duì)微丸制備工藝的考察，確定滴頭口徑0.9mm，滴距3cm，滴速2ml/min，干燥溫度45℃，干燥時(shí)間24h是制備微丸的最佳工藝。處方單因素試驗(yàn)顯示，氯化鈣溶液濃度、海藻酸鈉溶液濃度

6、和氯化鈣溶液pH對(duì)微丸的釋放有較大影響，對(duì)正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行極差分析，確定制備微丸的最優(yōu)處方為：1％氯化鈣溶液濃度，2％海藻酸鈉溶液濃度和pH4氯化鈣溶液。
　　 吲哚美辛微丸HPLC釋放度測(cè)定方法的系統(tǒng)適用性試驗(yàn)結(jié)果：吲哚美辛的保留時(shí)間為9.995min；方法回收率在：93.80％～101.28％，方法精密度RSD小于3％，符合中國(guó)藥典規(guī)定。此方法能夠準(zhǔn)確測(cè)定吲哚美辛微丸的釋放度。
　　 在高溫條件下，微丸的性狀及釋放度

7、均無(wú)顯著性變化，表明吲哚美辛微丸對(duì)熱穩(wěn)定。在高濕條件下，微丸吸濕嚴(yán)重，表明吲哚美辛微丸對(duì)濕不穩(wěn)定，應(yīng)在干燥環(huán)境下保存。在光照條件下，微丸的性狀無(wú)顯著性變化，釋放度稍有降低，表明吲哚美辛微丸對(duì)光不穩(wěn)定，應(yīng)避光保存。
　　 吲哚美辛微丸（實(shí)驗(yàn)組）大鼠口服給藥后盲腸和結(jié)腸中吲哚美辛的濃度明顯高于對(duì)照組，平均峰濃度分別為1.24±0.15μg/g和1.97±0.26μg/g，血藥濃度相對(duì)較低而平穩(wěn)，達(dá)峰時(shí)間為13 h，峰濃度6.26±1

8、.08μg/g；吲哚美辛混懸液（對(duì)照組）平均峰濃度為0.22±0.05μg/g和0.58±0.09μg/g，血藥濃度相對(duì)較高，達(dá)峰時(shí)間為3h，峰濃度為10.14±1.89μg/g。微丸中吲哚美辛主要分布于盲腸和結(jié)腸中，而在上消化道中檢測(cè)到很少的藥物?；鞈乙褐械倪胚崦佬林饕植加谏舷?，盲腸和結(jié)腸中的藥物濃度卻很低。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的AUC值分別是71.35±2.56μg·h/mL和88.67±8.34μg·h/mL，統(tǒng)計(jì)分析表明兩者之間

9、有顯著性差異（p<0.05）。和對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組的相對(duì)生物利用度為80.47％。
　　 結(jié)論：以海藻酸鈉/氯化鈣為輔料制備的吲哚美辛微丸具有良好的體外釋藥特征，重現(xiàn)性好；微丸和混懸液中的吲哚美辛在體內(nèi)的分布是不同的，混懸液中的吲哚美辛主要分布于上消化道；而微丸中的吲哚美辛，主要分布于盲腸和結(jié)腸。藥物在消化道的吸收部位不同，其藥代動(dòng)力學(xué)特征和參數(shù)也不同?？傊緦?shí)驗(yàn)制備的海藻酸鈉/氯化鈣結(jié)腸靶向微丸在大鼠體內(nèi)有良好的結(jié)腸靶向性，