氫氣飽和生理鹽水對大鼠蛛網膜下腔出血后繼發(fā)血管損傷的治療作用.pdf

1、背景：
　　 蛛網膜下腔出血(Subarachnoidhemorrhage，SAH)是神經外科臨床常見的死亡率及致殘率極高的疾病。腦血管痙攣(Cerebralvasospasm，CVS)是造成延遲性腦缺血(Delayedcerebralischemia，DCI)這一SAH嚴重繼發(fā)損傷的主要原因。CVS的發(fā)病機制一般認為與氧化應激、大量氧自由基產生及局部炎癥反應等有關。氫氣(Hydrogen，H2)在醫(yī)學上最早被用于預防減壓病的發(fā)

2、生。而近期的研究發(fā)現(xiàn)其可作為一種新型選擇性抗氧化劑在缺血再灌注損傷、缺血缺氧性腦病、炎癥性疾病中起保護作用，其機制可能除抗氧自由基外，還與抗炎癥反應有關。考慮到H2本身安全性較差，且不易保存，而研究表明氫氣飽和生理鹽水(Hydrogensaturatedsaline，HS)是理想的替代H2的給藥手段。然而H2及HS確切作用機制及其細胞內信號轉導機理目前尚未闡明，其可能的神經保護作用途徑、治療時間窗、安全性等仍有待進一步證實。
　　

3、 目的：
　　 本實驗擬利用動物模型上，以氧自由基、炎癥介質為主要指標，通過神經功能、生化、組化等方面觀察HS治療對CVS發(fā)生、發(fā)展及繼發(fā)性腦損傷的影響，以進一步探討H2的神經保護作用的細胞分子機制，尋找治療SAH后CVS的新途徑。
　　 方法：
　　 通過建立SAH大鼠枕大池一次注血模型，并分為三組(20只/組)：假手術陰性對照組、SAH損傷陽性對照組、HS治療組，動物術后分別腹腔注射給予生理鹽水及5ml/k

4、g劑量HS。并于手術后48小時處死，留取標本。通過觀察術后大鼠神經功能評分改變、HE染色組織病理學變化及BA脂質過氧化指標和內源性抗氧化酶(MDA、SOD及GPx)活性指標變化，并應用EMSA及ELISA分別檢測炎癥相關因子NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α及ICAM-1的表達水平，以探討氫氣飽和生理鹽水對SAH后CVS大鼠神經保護作用機制。
　　 統(tǒng)計學處理均采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件包進行，數據以均數±標準差(M

5、ean±SD)表示。組間數據分析應用方差分析連續(xù)變量，Kruskal-Wallis檢驗分析不連續(xù)變量。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果：
　　 SAHHS治療組對比SAH陽性對照組SAH后48小時的神經功能評分則顯著下降(中位數評分4[3-5]vs9[7-11]，P<0.05)。HS治療后較SAH損傷后血管內周長有明顯增加且血管壁厚度減小(829.37±18.61vs658.45±15.06μm，P<0.0

6、1；16.89±0.84vs25.15±0.94μm，P<0.01)。HS治療可以顯著緩解SAH誘發(fā)的MDA表達下降、SOD及GPx表達減少(MDA：0.93±0.04vs1.56±0.06nmol/mg，P<0.01；SOD：37.81±2.58vs25.17±2.12U/mg，P<0.01；GPx：103.43±3.82vs74.57±3.21nmol/min/mg，P<0.01)。HS可以降低SAHBA中的NF-κB結合活性(8.

7、77±0.68vs17.43±0.77ADU，P<0.01)。另外HS治療還可以降低SAH誘發(fā)的BA中IL-1β，IL-6，TNF-α，與ICAM-1的濃度升高(IL-1β：31.54±3.25vs65.62±2.48pg/mg；IL-6:3.95±0.18vs7.03±0.20pg/mg；TNF-α：1.20±0.17vs2.16±0.20pg/mg；ICAM-1：3.08±0.21vs6.11±0.35pg/mg，P值均小于0.01