冠心Ⅱ號(hào)心臟保護(hù)作用的物質(zhì)基礎(chǔ)及其舒張大鼠胸主動(dòng)脈機(jī)制的研究.pdf

1、背景:方劑是中醫(yī)臨床治療疾病的主要工具與手段，其臨床療效經(jīng)過(guò)幾千年的實(shí)踐已毋庸置疑。但是是什么活性成分產(chǎn)生了方劑療效作用，機(jī)制是什么，該問(wèn)題一直是長(zhǎng)期存在的重大問(wèn)題，也是制約中醫(yī)藥現(xiàn)代化的瓶頸。本課題擬采用BAP策略研究冠心Ⅱ的心臟保護(hù)作用的物質(zhì)基礎(chǔ)和其舒張大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)的機(jī)制，從而解決這長(zhǎng)期困擾中醫(yī)藥學(xué)術(shù)界的難題。
　　 1、冠心Ⅱ心臟保護(hù)作用的物質(zhì)基礎(chǔ)研究回顧
　　 目的:回顧冠心Ⅱ號(hào)和其吸收活性物質(zhì)FTAPE單獨(dú)和

2、聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大鼠的心臟保護(hù)作用。方法:利用我課題組資料，采用結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支法建立大鼠急性心肌梗死模型。用HPLC測(cè)得冠心Ⅱ號(hào)的五種主要成分含量(mg/g)如下:丹參素:0.936±0.013;阿魏酸:0.169±0.004;羥基紅花黃色素A:2.591±0.021;原兒茶醛0.018±0.001(P);芍藥苷3.715±0.123(E)。FTAPE單獨(dú)和聯(lián)合應(yīng)用和母方療效比較。結(jié)果:將FTA混合物與母方療效比較，F(xiàn)AT劑量等于母方中

3、含量?jī)烧咝呐K保護(hù)作用療效類似。結(jié)論:冠心Ⅱ號(hào)的心臟保護(hù)作用是由吸收的FTA三成分引起的。
　　 2、丹參素舒張大鼠胸主動(dòng)脈機(jī)制研究
　　 目的:明確丹參素對(duì)大鼠離體血管環(huán)張力的影響，探討其具體機(jī)制。
　　 方法:采用大鼠離體胸主動(dòng)脈灌流技術(shù)，以累積濃度法觀測(cè)丹參素（10-1M～10-6M）對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)、苯丙腎上腺素(1μmol/L)和氯化鉀KCl(60mmol/L)預(yù)收縮的血管環(huán)張力的影響;運(yùn)用一氧化氮合酶抑制劑N

4、-硝基-L-精氨酸甲酯(10μmol/L)、鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑亞甲藍(lán)（10μmol/L）、環(huán)氧合酶抑制劑吲哚美辛（10μmol/L）處理血管環(huán)，探討影響血管環(huán)張力的機(jī)制。結(jié)果:對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)或氯化鉀(60mmol/L)預(yù)收縮的血管環(huán)無(wú)影響，而對(duì)苯丙腎上腺素(1μmol/L)預(yù)收縮的內(nèi)皮完整血管環(huán)產(chǎn)生濃度依賴性的舒張作用，并且去除內(nèi)皮后的舒張作用被取消。用N-硝基-L-精氨酸甲酯（10μmol/L）和亞甲藍(lán)（10μmol/L）預(yù)處理后，均可阻

5、斷的舒張血管作用，而用吲哚美辛（10μmol/L）預(yù)處理后未能阻斷的血管舒張作用。結(jié)論:丹參素(T)(10-1M～10-6M)通過(guò)NO-sGC-cGMP途徑產(chǎn)生內(nèi)皮依賴的血管舒張作用。
　　 3、阿魏酸舒張大鼠胸主動(dòng)脈機(jī)制研究
　　 目的:明確阿魏酸對(duì)大鼠離體血管環(huán)張力的影響，探討其具體機(jī)制。
　　 方法:采用大鼠離體胸主動(dòng)脈灌流技術(shù)，以累積濃度法觀測(cè)阿魏酸(10-1mM～103mM)對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)、苯丙腎上腺素(1

6、μmol/L)和氯化鉀（60mmol/L）預(yù)收縮的血管環(huán)張力的影響;在無(wú)鈣K-H液中，以累積濃度法觀測(cè)阿魏酸(10-1mM～103mM)對(duì)苯丙腎上腺素和咖啡因預(yù)收縮的血管環(huán)張力的影響;分別運(yùn)用鉀通道阻斷劑四乙胺(10mmol/L)、格列本脲(10μmol/L)、氯化鋇(1 mmol/L)、4-氨基吡啶(1mmol/L)處理血管環(huán)，探討影響血管環(huán)張力的機(jī)制。結(jié)果:對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)或氯化鉀(60mmol/L)預(yù)收縮的血管環(huán)無(wú)影響，而對(duì)苯丙腎上腺素

7、（1μmol/L）預(yù)收縮的內(nèi)皮完整和去內(nèi)皮的血管環(huán)產(chǎn)生濃度依賴性的舒張作用，并且去除內(nèi)皮后的舒張作用未受影響。在無(wú)鈣K-H液中，可舒張咖啡因(20mol/L)預(yù)收縮的血管環(huán)。格列本脲可部分阻斷阿魏酸（10-1mM～103mM）舒張血管環(huán)的作用。結(jié)論:我們最終認(rèn)為阿魏酸(F)(10-1mM～103mM)舒張血管環(huán)的機(jī)制是非內(nèi)皮依賴性的，是通過(guò)阻滯ROC進(jìn)一步抑制細(xì)胞內(nèi)肌漿網(wǎng)中ryanodine或咖啡因敏感鈣池的Ca2+釋放和一定程度上是通

8、過(guò)開(kāi)放ATP敏感性鉀通道(ATP-Sensitive potassium channel，KATP)而實(shí)現(xiàn)的。
　　 4、羥基紅花黃色素A舒張大鼠胸主動(dòng)脈機(jī)制研究
　　 目的:明確羥基紅花黃色素A對(duì)大鼠離體血管環(huán)張力的影響，探討其具體機(jī)制。方法:采用大鼠離體胸主動(dòng)脈灌流技術(shù)，以累積濃度法觀測(cè)羥基紅花黃色素A(10-1M～10-6M)對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)、苯丙腎上腺素（1μmol/L）和氯化鉀(60mmol/L)預(yù)收縮的血管環(huán)張力的

9、影響;運(yùn)用一氧化氮合酶抑制劑N-硝基-L-精氨酸甲酯環(huán)氧合酶抑制劑環(huán)氧合酶抑制劑吲哚美辛處理血管環(huán);在無(wú)鈣K-H液中，以累積濃度法觀測(cè)阿魏酸對(duì)苯丙腎上腺素（1μmol/L）和咖啡因(20mol/L)預(yù)收縮的血管環(huán)張力的影響;另外分別運(yùn)用鉀通道阻斷劑四乙胺(10mmol/L)、格列本脲（10μmol/L）、氯化鋇(1mmol/L)、4-氨基吡啶(1mmol/L)處理血管環(huán)，探討影響血管環(huán)張力的機(jī)制。結(jié)果:對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)預(yù)收縮的血管環(huán)無(wú)影響，而

10、對(duì)氯化鉀和苯丙腎上腺素預(yù)收縮的內(nèi)皮完整血管環(huán)產(chǎn)生濃度依賴性的舒張作用，并且去除內(nèi)皮后的舒張作用被部分抑制。用左吲哚美辛（10μmol/L）預(yù)處理后，可部分阻斷的舒張血管作用，而用N-硝基-L-精氨酸甲酯(10μmol/L)預(yù)處理后未能阻斷的血管舒張作用。在無(wú)鈣K-H液中，可舒張苯丙腎上腺預(yù)收縮的血管環(huán)。4-氨基吡啶(1mmol/L)可部分阻斷阿魏酸舒張血管環(huán)的作用。結(jié)論:綜上所述，我們最終認(rèn)為羥基紅花黃色素A(A)(10-1M～10-6

11、M)舒張血管環(huán)的機(jī)制是內(nèi)皮依賴性和非內(nèi)皮依賴性兩種機(jī)制共同作用的結(jié)果。其中內(nèi)皮依賴性舒張機(jī)制是通過(guò)前列腺素類物質(zhì)的產(chǎn)生與特異性受體結(jié)合后發(fā)揮擴(kuò)張血管的作用;非內(nèi)皮依賴性是通過(guò)通過(guò)阻滯ROC和VOC進(jìn)一步抑制細(xì)胞內(nèi)IP3敏感Ca2+通道的開(kāi)放和一定程度上是通過(guò)開(kāi)放電壓依賴型鉀通道(voltage dependent potassium channel，KV)而實(shí)現(xiàn)的。
　　 總結(jié):冠心Ⅱ號(hào)有多靶點(diǎn)的心臟保護(hù)作用，我們證明FTA是心