星形膠質(zhì)細胞活化與表皮生長因子受體表達的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:研究活化星形膠質(zhì)細胞(Astrocyte,Ast)表皮生長因子受體(epithelial growth factor receptor,EGFR)的表達變化,探討EGFR對星形膠質(zhì)細胞活化所起的關(guān)鍵作用。
　　方法:采用振蕩培養(yǎng)法結(jié)合差速貼壁法分離純化培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞,將得到的第二代星形膠質(zhì)細胞分為對照組、活化組、抑制組:將常規(guī)用含10％FBS的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后的星形膠質(zhì)細胞作為對照組細胞,用加入20ng/ml睫狀

2、神經(jīng)營養(yǎng)因子、10%FBS的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后的星形膠質(zhì)細胞為活化組細胞,將含30μmol/L Genistein、10%FBS的DMEM培養(yǎng)基作用于活化組細胞再培養(yǎng)24h后的細胞作為抑制組細胞。通過免疫熒光化學觀察各組細胞的形態(tài)變化;應(yīng)用半定量RT-PCR方法分析各組細胞間膠原纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)mRNA及EGFR mRNA表達變化。
　　結(jié)果:活化組與

3、對照組比較,星形膠質(zhì)細胞細胞數(shù)量增多,胞體變大,突起增多變長,交織成網(wǎng)狀;RT-PCR示不僅GFAP mRNA表達增高,EGFR mMRA表達亦明顯增高,與對照組比較有顯著差異(P<0.01);應(yīng)用EGFR抑制劑Genistein干預后,與活化組相比,星形膠質(zhì)細胞數(shù)量不再增多,細胞胞體變小,突起減少縮短,星形膠質(zhì)細胞活化被抑制,GFAP mRNA表達下降,與活化組比較有顯著差異(P<0.01)。
　　結(jié)論:1.活化后的星形膠質(zhì)細胞