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文檔簡(jiǎn)介
1、通過(guò)單因子和多因子搖瓶正交試驗(yàn),確定了米曲霉液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)氨基?;傅淖罴寻l(fā)酵條件。優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基組成(ρ/g L-1):葡萄糖40,蔗糖10,可溶性淀粉20,蛋白胨2.5,馬鈴薯液1000mL,pH自然。培養(yǎng)基裝量50mL/250mL三角瓶,接種量4%。培養(yǎng)溫度30℃,轉(zhuǎn)速100 rmin-1,發(fā)酵時(shí)間42h。每50mL培養(yǎng)物的總酶活由優(yōu)化前的2627U提高到7338U,是優(yōu)化前的2.79倍。
研究了米曲霉氨基酰化酶的部分酶
2、學(xué)性質(zhì),該酶催化反應(yīng)的最適pH為7.0,最適溫度為40℃,低濃度的Co2+(5×10-4mol/L)對(duì)酶活激活作用顯著,催化反應(yīng)過(guò)程中,底物濃度大于0.2 mol/L時(shí),存在高濃度底物抑制酶活力現(xiàn)象。
初步探索了包埋法固定化米曲霉氨基?;傅妮d體,在實(shí)驗(yàn)的五種載體中,以海藻酸鈉為載體包埋固定化米曲霉氨基?;该富畋A袈矢撸也僮骱?jiǎn)單,成本低廉。對(duì)包埋法固定化米曲霉氨基酰化酶酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了研究,較游離米曲霉氨基?;福钸m溫
3、度未發(fā)生改變,最適pH向堿性范圍偏移至8.0,對(duì)酸堿和熱的穩(wěn)定性增強(qiáng),最適底物濃度增大到0.4 mol/L。
根據(jù)氨基?;改芰Ⅲw專(zhuān)一水解L-氨基?;锏奶攸c(diǎn),利用米曲霉氨基?;笇?duì)消旋苯丙氨酸進(jìn)行了拆分。在米曲霉氨基酰化酶選擇性的作用于底物N-乙酰-L-苯丙氨酸,得到L-苯丙氨酸后,通過(guò)732陽(yáng)離子樹(shù)脂和結(jié)晶法分別將L-苯丙氨酸和N-乙酰-D-苯丙氨酸分離,N-乙酰-D-苯丙氨酸通過(guò)酸水解脫去乙?;玫紻-苯丙氨酸,拆分
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