基于血清藥物化學的逍遙散抗抑郁有效部位藥代動力學初探.pdf

1、選題依據(jù):抑郁癥為一種常見的精神疾病，預測其到2020年將要成為世界第二大致殘性疾病，受到眾多醫(yī)藥工作者的重視。因現(xiàn)有的西藥具有復發(fā)率高和副作用大等問題，從中藥中研發(fā)理想的抗抑郁藥就成為研究熱點。逍遙散作為傳統(tǒng)的抗抑郁名方為眾多研究者的首選，但其抗抑郁物質(zhì)基礎(chǔ)、藥物在體內(nèi)代謝特征及作用機理均不明確。本課題組前期研究已經(jīng)明確了逍遙散中石油醚部位具有抗抑郁活性，但是有效部位進入生物體內(nèi)后有哪些化學成分在治療作用、它們之間是否有協(xié)調(diào)作用、又是

2、怎樣協(xié)調(diào)發(fā)揮作用來改善機體的狀態(tài)、藥物的作用機制及其體內(nèi)動態(tài)變化規(guī)律等問題都不清楚，所以對逍遙散石油醚部位進行藥代動力學的研究成為必不可少的研究內(nèi)容。
　　目的:通過逍遙散抗抑郁有效部位的血清藥物化學方法，找出血清中移行成分，對其藥代動力學特征進行初步摸索，為下一步逍遙散藥動學-藥效學相關(guān)性探索以及逍遙散臨床合理用藥提供科學依據(jù)。
　　方法:首先，采用逍遙散抗抑郁有效部位的體外模擬血清樣品，建立血清藥物化學的分析方法與樣品處

3、理方法;再對給藥途徑、給藥劑量和藥物溶媒等因素優(yōu)化，進行血清藥物化學研究，查找血與組織中移行成分;然后，通過與對照品保留時間、紫外掃描圖譜比較，并參考文獻，對口服逍遙散石油醚部位后血中移行成分進行歸屬與指認;針對對照品不易獲得的目標成分采用傳統(tǒng)的植化方法制備，并進行結(jié)構(gòu)鑒定;最后，根據(jù)前期研究確定目標藥效成分，并考察灌胃給予大鼠逍遙散石油醚部位后其藥代動力學行為，進行藥動學研究。
　　結(jié)果:1.采用逍遙散抗抑郁有效部位的體外模擬血

4、清樣品，比較了用不同溶劑進行蛋白沉淀法與液液萃取法處理的血清樣品處理方法，結(jié)果發(fā)現(xiàn)利用乙醚:異丙醇(95∶5)+10％HCl萃取法萃取率最高，平均回收率可達81.96％。
　　2.灌胃給予大鼠逍遙散石油醚部位后對其血中移行成分進行研究，在血清中發(fā)現(xiàn)了11個血中移行成分，其中8個成分是來自復方逍遙散石油醚部位的原型，且歸屬于柴胡、甘草和當歸，指認出2種化合物，分別為2，8，10-十五烷三烯-4，6-二炔-1-醇(CH-1)和2，8，

5、10-十五烷三烯-4，6-二炔-1-醇-乙酯(CH-2)，均源自柴胡藥材，其他3個移行成分則可能是原型成分給藥后在體內(nèi)經(jīng)代謝產(chǎn)生的代謝物;對尾靜脈注射后心臟、肝臟和腦組織中移行成分進行分析，結(jié)果均發(fā)現(xiàn)13個分布成分，其中12個成分為原型，歸屬于柴胡、當歸和白術(shù)，另1個推測為代謝物，指認出其中4種化合物，分別為CH-1、CH-2、藁本內(nèi)酯和白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ。血清與組織中均指認出源自君藥柴胡的化合物CH-1和CH-2在體內(nèi)穩(wěn)定存在，推測為藥效成分

6、，因此以其為目標進行藥代動力學研究。
　　3.建立了同時測定血清中CH-1和CH-2的測定方法，并進行了嚴格的方法學考察，CH-1和CH-2的線性范圍分別為0.67μg/ml～201μg/ml和0.55μg/ml～165μg/ml，最低定量限(LLOQ)分別為標準曲線最低點0.67μg/ml和0.55μg/ml，該方法簡單穩(wěn)定、準確可靠，可用于其藥代動力學研究。灌胃給予大鼠3個不同劑量的逍遙散石油醚部位后，不同時間點采血并測定其血

7、藥濃度，并利用DAS3.0對結(jié)果進行統(tǒng)計分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)CH-1和CH-2化合物血藥濃度-時間曲線具有雙峰現(xiàn)象，吸收快(Cmax分別為0.75～0.79h和0.71～1.0h)、消除慢(t1/2β較大分別為17～35h和20～29h)、在大鼠體內(nèi)兩者都符合二室模型的特點。給予3個劑量逍遙散石油醚部位后，通過比較其藥動參數(shù)AUC(0～∞)和Cmax值，化合物CH-1、CH-2的體內(nèi)吸收和給藥劑量之間并不存在線性關(guān)系。
　　結(jié)論:1.本