蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵條件的優(yōu)化及有效成份提取方法的研究.pdf

1、冬蟲夏草是我國名貴的藥用真菌，與人參、鹿茸并稱為中藥三大補(bǔ)品。目前，天然蟲草已瀕臨滅絕。大量研究表明，蝙蝠蛾擬青霉菌絲粉在化學(xué)成份、藥理作用及臨床效果上與天然蟲草基本一致。而且蝙蝠蛾擬青霉是國家允許使用的可藥食兩用的真菌菌種。 本報(bào)告以蝙蝠蛾擬青霉CS10為試驗(yàn)菌株，對(duì)搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，并進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。研究結(jié)果如下： 最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方：蔗糖4％豆餅粉4％KH2PO40.15％MgSO40.1％

2、 最佳搖瓶發(fā)酵條件：初始pH6.5，裝液量100mL/500mL，種齡為36h，接種量為5％，溫度為25℃，搖床轉(zhuǎn)速170r/min。菌絲體收率為40.12g/L。與原配方比，菌絲體收率提高了31.75％。 最佳發(fā)酵罐發(fā)酵條件：通風(fēng)量1：0.75(V/V.min)，10L發(fā)酵罐裝料量為8L，，攪拌速率200r/min。通過在發(fā)酵過程中流加4mol/L的NaOH和2mol/L的HCL將pH分別控制在6.0、6.5、7.0，當(dāng)p

3、H=6.5時(shí)菌絲體收率最高為34.78g/L，同不控制發(fā)酵pH相比，菌絲體收率增長了13％。 蝙蝠蛾擬青霉菌絲粉主要是水煎煮處理，缺點(diǎn)是劑量大，有效成份損失，質(zhì)量控制也存在缺陷，本報(bào)告采用水浸提法、酶法、超聲波法和超微粉技術(shù)對(duì)菌粉進(jìn)行處理，目的是找到一種提高蟲草發(fā)酵產(chǎn)品質(zhì)量的提取工藝。研究結(jié)果如下： 水浸提法最佳提取工藝：菌粉：水=1：10，浸提2h，浸提2次，浸提溫度70℃，甘露醇含量11.2％，腺苷含量1670μg/

4、g。 酶法提取的最佳工藝：浸提pH5.5，浸提溫度40℃，最佳酶組合：纖維素酶0.1％+蝸牛酶0.1％，甘露醇含量12.56％，腺苷含量2065μg/g。 超聲波法最佳提取條件：超聲波功率250W，作用10min，作用方式：處理60s，間歇10s，浸提pH5.0，甘露醇含量10.56％，腺苷含量1670μg/g。 超微粉甘露醇含量11.76％，腺苷含量2970μg/g，與未處理菌粉相比分別提高了16％和70％。

5、 結(jié)論：酶法提取的甘露醇和腺苷含量最高，而且處理溫度低，耗能少，節(jié)約能源，并且可連續(xù)進(jìn)行處理，單次處理數(shù)量大，處理時(shí)間短。超微粉提取效果也比較好，但處理成本高，時(shí)間長。 另外，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，冬蟲夏草發(fā)酵液中可能含有某種抑菌物質(zhì)，具有抗菌、抗腫瘤等作用。本研究對(duì)蝙蝠蛾擬青霉菌絲體及過濾廢液中抑菌活性物質(zhì)進(jìn)行了初步研究，結(jié)果表明： 蝙蝠蛾擬青霉菌絲體對(duì)金黃色葡萄球菌有抑制作用，抑菌圈直徑為20mm。濃縮20倍的過濾廢液對(duì)