過(guò)氧化物酶和固定化多酚氧化酶的催化特性及其在兒茶素氧化中的應(yīng)用.pdf

1、兒茶素氧化聚合物有許多生理藥理功能，針對(duì)目前對(duì)非茶黃素類聚合物研究的缺乏，本論文探究了過(guò)氧化物酶和固定化多酚氧化酶作用于兒茶素主體成分表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)的催化特性，并通過(guò)IPPO、POD、O2、H2O2組合而成的8種酶組合分別氧化EGCG、EC、EGCG/EC和TP98四種兒茶素進(jìn)行了最佳酶組合的篩選，最后以篩選出的最佳酶組合催化氧化EGCG、EC和TP98三種兒茶素，對(duì)其形成新聚合物的反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明：<

2、br>　　 1.過(guò)氧化物酶和固定化多酚氧化酶催化氧化EGCG均能夠生成非茶黃素類的新聚合物，分別命名為P1和P，物質(zhì)P在溫度50 ℃、底物濃度1.5％、反應(yīng)至10 min時(shí)生成量最大，在上述反應(yīng)條件下，其反應(yīng)動(dòng)力學(xué)符合米式方程，測(cè)得最大反應(yīng)速度Vmax值為0.108 OD/min，米氏常數(shù)Km值為2.565mg/mL。物質(zhì)P1在反應(yīng)條件pH 3.0、溫度20 ℃、底物濃度0.5g/30 mL、H2O2加入量1 mL時(shí)含量最大。

3、　　 2.在酶組合的篩選實(shí)驗(yàn)中，C組合(POD+H2O2)催化氧化EGCG后生成非茶黃素類物質(zhì)P2的含量最大，B組合(IPPO+O2)催化氧化EC后生成物質(zhì)P3的含量最大，A組合酶促氧化TP98后生成物質(zhì)P4的含量最大。兒茶素EC較EGCG不穩(wěn)定，更易于生成聚合度高的物質(zhì)。
　　 3.對(duì)篩選后的酶組合催化氧化三種兒茶素生成新聚合物的反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)選，結(jié)果顯示，pH值對(duì)C組合催化氧化EGCG形成物質(zhì)P2的影響顯著(P<0.1)