金屬酞菁羧酸衍生物的合成及其在蛋白質(zhì)分析中的應用.pdf

1、酞菁是一類在結(jié)構(gòu)上與卟啉、葉綠素很相似的化合物。由于酞菁對光、熱的穩(wěn)定性好，在染料、顏料、光電材料、催化劑、光動力學療法、熒光分析等方面得到愈來愈廣泛的應用。本文在前人研究的基礎(chǔ)上，繼續(xù)開拓酞菁化合物在蛋白質(zhì)分析中的應用。本論文共分三章。 第一章為緒論，首先綜述了酞菁化合物的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、合成和應用，著重介紹了它在生物分析中的應用；同時結(jié)合本文研究所涉及的領(lǐng)域，對蛋白質(zhì)分析的研究現(xiàn)狀作了綜述，重點介紹了蛋白質(zhì)光度分析法，如分光光度

2、法、熒光光度法、共振散射法等方法研究的現(xiàn)狀。然后提出了論文設(shè)想。 第二章以4-羧基鄰苯二甲酸酐為主要原料，鉬酸銨作催化劑，煤油作溶劑，在185～195℃條件下，液相法合成了三個具有代表性的四羧基金屬酞菁衍生物(CoC<,4>Pc、AlC<,4>Pc、MnC<,4>Pc)，并用紫外光譜、紅外光譜對其進行表征。 第三章運用共振散射法研究了三種四羧基金屬酞菁衍生物與蛋白質(zhì)的相互作用： (1)根據(jù)蛋白質(zhì)在弱酸性條件下對C

3、oC<,4>Pc散射信號的增強作用，建立了一種基于共振散射技術(shù)檢測蛋白質(zhì)的新方法。實驗結(jié)果表明，在pH3.0的B-R緩沖溶液中，反應體系最大RLS位于332nm。在最佳實驗條件下，BSA、HSA、γ-IgG、EA的線性范圍分別是0.0-1.79μgmL<'-1>、0．0-1.50μg mL<'-1>、0-1.75μg mL<'-1>、0-2.0μg mL<'-1>，檢測限分別是17.72ng mL<'-1>，16.02ngmL<'-1>

4、，16．84 ng mL<'-1>、19.20ng mL<'-1>。該方法用于人血清樣品中總蛋白的檢測，分析結(jié)果與臨床數(shù)據(jù)相吻合。 (2)在pH3.5的Britton-Robinson緩沖介質(zhì)中，適量蛋白質(zhì)能增強AlC<,4>Pc的共振散射信號，最大RLS位于388nm處，由此建立了共振散射法測定蛋白質(zhì)的方法。BSA、HSA、γ-IgG、EA、TPHS線性范圍分別為0-1.75μg mL<'-1>、0-1.50μg mL<'-1

5、>、0-2.00μg mL<'-1>、0-2.50μg mL<'-1>、0-1.63μg mL<'-1>，檢測限分別為15.71 ng mL<'-1>、15.79 ng mL<'-1>、16.61 ng mL<'-1>、14.80 ng mL<'-1>、17.89 ng mL<'-1>，用TPHS為標準檢測人血清樣品中總蛋白，檢測結(jié)果與雙縮脲法結(jié)果相符。 (3)在pH3.0的Britton-Robinson緩沖介質(zhì)中，適量的蛋白

6、質(zhì)能夠增強MnC<,4>Pc的共振散射信號，反應體系最大RLS位于385nm處，且增強的散射信號與蛋白質(zhì)的濃度在一定范圍內(nèi)呈正比。據(jù)此建立了MnC<,4>Pc共振散射法檢測微量蛋白質(zhì)的新方法。在最佳條件下，測定BSA、HSA、γ-IgG、EA的線性范圍分別是0-2.0μg mL<'-1>、0-2.0μg mL<'-1>、0-1.75μg mL<'-1>、0-1.75μg mL<'-1>，檢測限分別是16.37 ng mL<'-1>、17