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文檔簡介
1、癌癥是嚴(yán)重威脅人類生命的疾病,其主要治療手段之一是放射治療。常規(guī)放療采用的X、γ、電子等射線由于照射劑量隨深度的增加而呈指數(shù)衰減,對正常組織有殺傷作用,產(chǎn)生嚴(yán)重的放射并發(fā)癥和后遺癥。重離子束具有Bragg峰,能使高吸收劑量區(qū)集中于腫瘤部位,從而有效地保護(hù)周圍的健康組織,且具有相對生物效應(yīng)高、修復(fù)效率低等特點(diǎn),成為當(dāng)今國際上最先進(jìn)、最科學(xué)和最有效的放療手段,被公認(rèn)為21世紀(jì)最理想的放療用射線。自1995年中國成為繼美國、德國、日本后第四個
2、開展重離子治療腫瘤的研究國家,中國科學(xué)院蘭州近代物理研究所以國家攻關(guān)項目為起點(diǎn),進(jìn)行了分子生物、細(xì)胞生物學(xué)和動物試驗(yàn)等大量研究,但對于口腔腫瘤研究極少。本論文探索重離子束對人舌鱗癌Tb細(xì)胞的放射生物效應(yīng),旨在為我國開展臨床治療積累實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 本研究采用碳離子束輻照人舌鱗癌Tb細(xì)胞,劑量分別為0.5、1、2、4 Gy。利用MTT法檢測細(xì)胞存活并繪制存活曲線;采用Hoechst 33258/PI復(fù)染法在熒光顯微鏡下觀察Tb細(xì)胞凋亡形
3、態(tài);Western-blot法檢測Tb細(xì)胞Bax/Bcl-2蛋白表達(dá)情況;用FACSCalibur流式細(xì)胞分析儀檢測Tb細(xì)胞周期變化,并與X射線輻照作對比,計算相對生物效應(yīng)(RBE)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,Tb細(xì)胞經(jīng)碳離子束輻照后,存活率顯著下降,呈劑量依賴性的生長抑制;Tb細(xì)胞呈現(xiàn)藍(lán)色熒光濃集成團(tuán)的凋亡形態(tài),且凋亡比例隨輻照劑量增加;Western-blot結(jié)果顯示Bax蛋白表達(dá)水平隨輻照劑量的增大逐漸上升,但在4Gv組其表達(dá)不再增
4、高,Bcl-2蛋白則隨劑量呈下降趨勢;Tb細(xì)胞出現(xiàn)G2/M期明顯阻滯,阻滯程度具有劑量和時間依賴性。當(dāng)輻照劑量為0.5Gy,1Gy時,Tb細(xì)胞12h后出現(xiàn)阻滯高峰,24h回落。Tb細(xì)胞在x射線輻照后,2.0Gy組激活G1期檢測點(diǎn),而4、6、8Gy組激活G2期檢測點(diǎn),在輻照劑量為為6Gy時,細(xì)胞G2期阻滯率達(dá)到70%,相當(dāng)于2Gy重離子輻照,即相對生物效應(yīng)(RBE)為3。 通過本研究可以得到如下結(jié)論:重離子束輻照對人舌鱗癌Tb細(xì)胞
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