固定化脂肪酶在有機(jī)相中催化反應(yīng).pdf

1、固定化脂肪酶催化有機(jī)介質(zhì)中的反應(yīng)是近年來酶工程領(lǐng)域的新技術(shù)。本文對來源于Cadida rugosa的脂肪酶進(jìn)行了固定化，優(yōu)化了固定化的條件，研究了固定化酶的活性和穩(wěn)定性以及催化酯化反應(yīng)的動力學(xué)。 采用吸附法，對八種樹脂載體進(jìn)行篩選，酶活實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，大孔吸附樹脂AB-8性能最優(yōu)。脂肪酶固定化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，緩沖液最佳pH為7.2，最適溫度為30℃，最佳固定化時(shí)間為1h，載體：酶=10:1，即0.3g樹脂固定30mg酶粉。

2、 以月桂酸與月桂醇的酯化為模型反應(yīng)，考查了固定化酶催化反應(yīng)的影響因素。結(jié)果表明，異辛烷為最適有機(jī)溶劑，最佳含水量為50μL，最優(yōu)反應(yīng)溫度為30℃，在180rpm，反應(yīng)時(shí)間24小時(shí)，月桂酸的轉(zhuǎn)化率達(dá)到81％。考查了固定化酶的穩(wěn)定性。結(jié)果表明，酶固定化后，熱穩(wěn)定性顯著提高，在60℃下，固定化酶的殘余活性為68％，而游離酶僅為32％。固定化酶的重復(fù)利用性良好，在重復(fù)使用10次后，酶活仍保持50.8％。將固定化酶分別在4℃，30℃，40℃下放置