乳源酪蛋白糖巨肽的分離與純化研究.pdf

1、酪蛋白糖巨肽(CGMP)是一種具有生物活性的高純度乳清蛋白。它是與乳過氧化物酶、乳鐵蛋白及蛋白水解酶、胨等共存于乳清中的微量蛋白質(zhì)。酪蛋白糖巨肽是在干酪生產(chǎn)過程中，凝乳酶分解乳中κ-酪蛋白后釋放的一種c-末端親水性糖肽。干酪乳清是酪蛋白糖巨肽工業(yè)化生產(chǎn)的理想原料，但由于乳糖、乳清蛋白及灰分的存在而使其大規(guī)模生產(chǎn)存在一定的技術(shù)困難?；诶业鞍滋蔷揠哪蜔嵝约捌渚酆象w與單體分子量的不同，改進分離方法旨在保證大規(guī)模生產(chǎn)的產(chǎn)量與較高的純度。　　

2、本實驗以市售乳清粉為原料，還原后采用超濾的方法分離制備酪蛋白糖巨肽，通過控制超濾的溫度、時間、壓力等條件，得到最佳超濾控制參數(shù)。酪蛋白糖巨肽同時也是一種具有多種營養(yǎng)及醫(yī)療功用的生物肽，實驗室通常用凝乳酶消化κ-酪蛋白去除κ-酪蛋白片斷以制備酪蛋白糖巨肽。酪蛋白糖巨肽用超濾和離子交換的方法從酪蛋白酸鹽水解液中分離出來已有報道，用凝膠色譜法分離的相應(yīng)信息卻很少。本實驗采用SephadexG-100凝膠對超濾后得到的酪蛋白糖巨肽混合物進行純化

3、，本實驗對凝膠柱尺寸、洗脫液、洗脫液流速等進行了研究，經(jīng)后續(xù)鑒定，結(jié)果表明純化效果明顯。最后用SDS-尿素凝膠電泳和氨基酸分析儀對純化后的酪蛋白糖巨肽分子量和含量進行定量分析，結(jié)果表明，酪蛋白糖巨肽的平均分子量為31637，和已報道的糖巨肽分子量32000相吻合；CGMP占乳清蛋白總量的22.35％；超濾法分離CGMP效果較明顯，CGMP占超濾凍干粉總蛋白含量的58.91％，凍干粉中CGMP蛋白含量為乳清粉中CGMP含量的2.6倍。Se