基于FRET原理的雙激發(fā)pH熒光比率探針的合成及光譜性能研究.pdf

1、隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展與社會的進(jìn)步，熒光比率技術(shù)已經(jīng)成為熒光分析法中最重要的一項技術(shù)。熒光比率技術(shù)就是利用兩個熒光發(fā)射峰的比率來對物質(zhì)進(jìn)行檢測，同常規(guī)的熒光探針相比，該探針最明顯的優(yōu)勢在于能夠消除探針分子濃度以及探針分子所處的環(huán)境等因素帶來的誤差，同時該探針大大增加了響應(yīng)的范圍，能夠提供更加精準(zhǔn)的實驗結(jié)果，給人們研究物質(zhì)的性質(zhì)帶來了極大地方便。因此，熒光比率探針得到了極大地發(fā)展。
　　雙激發(fā)熒光比率探針就屬于熒光比率探針中的一種，該探

2、針要求在兩個激發(fā)波長下熒光強(qiáng)度較強(qiáng)，且能很好地消除探針分子所處的環(huán)境所帶來的誤差。然而，現(xiàn)報道的小分子雙激發(fā)熒光比率探針受制于諸多因素：如兩個激發(fā)帶之間的距離相距較短(20-70 nm)，在一個激發(fā)波長下有很小的消光系數(shù)等缺點。這些缺點導(dǎo)致其在檢測熒光比率強(qiáng)度時出現(xiàn)誤差，為實驗帶來極大地不便。因此，希望設(shè)計一種新型的小分子雙激發(fā)熒光比率探針，該探針的受體與供體之間激發(fā)帶相距較遠(yuǎn)，同時，該探針在檢測熒光比率強(qiáng)度時能夠達(dá)到很高的要求，并能使

3、信號強(qiáng)度在動力學(xué)范圍內(nèi)得到大幅度地提高?；谏鲜隼碛?，基于FRET原理，設(shè)計合成了一種新型的香豆素-羅丹明熒光探針，該探針是第一個基于FRET原理的雙激發(fā)熒光比率探針，該探針不僅熒光強(qiáng)度較強(qiáng)，而且兩個激發(fā)帶之間相距較遠(yuǎn)(激發(fā)波長相差>160 nm)。在本文中，在此基礎(chǔ)上，設(shè)計合成了一種檢測pH值的熒光比率探針，能很好地受到空間與時間的控制，同時該熒光比率探針是一種安全可靠的比率模型。在本實驗中，檢測了外界pH值的變化對探針光譜性能的影響