蘆芛皂苷的提取、純化及其溶血活性研究.pdf

1、蘆筍皂苷是一類具有環(huán)戊烷多氫菲母核結(jié)構(gòu)的物質(zhì),其具有多種生物活性,高效的提取工藝和純化工藝可為開發(fā)蘆筍皂苷類藥物和保健品奠定良好的基礎(chǔ)。但蘆筍皂苷屬于甾體皂苷,甾體皂苷通過靜脈注射作為藥物使用時,會有溶血現(xiàn)象,這一特性大大限制了蘆筍皂苷的應用。本文主要研究了蘆筍皂苷含量測定的方法,提取純化工藝,并通過體外實驗對其溶血進行了評價,以及初步探討了蘆筍皂苷的結(jié)構(gòu)。通過上述實驗,得出以下結(jié)論:
　　 1、建立測定蘆筍總皂苷含量的分光光度

2、測法,選用菝葜皂苷元為對照品,比較硫酸-甲醇法、香草醛-高氯酸-冰醋酸法以及高氯酸法三種不同顯色劑對蘆筍皂苷反應適宜性,選用高氯酸法為蘆筍總皂苷的含量測定方法。在310nm下,蘆筍總皂苷及菝葜皂苷元均有最大吸收,菝葜皂苷元在72～216μg范圍內(nèi)有良好線性關(guān)系。此方法簡便、準確,適合于蘆筍總皂苷含量的測定。
　　 2、采用Box-Behnken設計和響應面分析法,對蘆筍總皂苷的超聲輔助提取工藝進行優(yōu)化。以提取溫度、提取時間及超聲

3、功率為自變量,蘆筍總皂苷得率為響應值,研究各自變量及其交互作用對超聲波輔助提取法提取蘆筍總皂苷得率的影響。結(jié)果表明:最佳工藝條件為乙醇濃度95％、提取溫度71℃、提取時間23min、超聲波功率70W、提取次數(shù)2次,在此條件下獲得總皂苷的提取率為23.96mg/g。
　　 3、采用靜態(tài)及動態(tài)吸附解吸試驗優(yōu)選適宜于蘆筍皂苷純化的大孔樹脂并優(yōu)化純化條件。結(jié)果表明:S-8型樹脂對蘆筍皂苷有較好的吸附和洗脫效果,并具有良好的脫色效果,其最

4、佳純化條件為:上樣濃度1mg/mL,上樣量60ml/g樹脂,用pH=7的75％的乙醇洗脫,洗脫劑用量為10mL/g樹脂。純化后得提取物中蘆筍皂苷的純度可達50.15％,脫色率為92.23％。
　　 4、本文采用肉眼觀察法和分光光度法兩種方法對蘆筍皂苷的溶血性進行了評價。實驗結(jié)果表明,蘆筍皂苷的溶血性具有劑量依賴性,蘆筍皂苷在濃度低于25μg·mL-1時,溶血率<5％,作為注射用藥不會引發(fā)溶血現(xiàn)象。
　　 5、本文通過泡沫