聚己內(nèi)酯-絲膠蛋白納米纖維支架的制備及相容性研究.pdf

1、靜電紡絲技術(shù)是制備組織工程支架材料最有效的方法之一。由電紡技術(shù)制備的支架，在結(jié)構(gòu)和功能上與天然細(xì)胞外基質(zhì)相似，且具有較好的生物相容性及一定的強度和穩(wěn)定性，是用于人體器官再造較理想的方式之一。
　　 目前，組織工程支架側(cè)重于聚合物混合的方法，而電紡支架通過將人工和天然的聚合物混合來增強材料的物理和生物學(xué)功能。PCL因其具有較好的力學(xué)性質(zhì)、生物降解性和生物相容性已在組織工程和藥物運輸方面廣泛應(yīng)用。然而其缺乏與細(xì)胞的識別位點以及自身的

2、強疏水性使其應(yīng)用受到限制。SS是來源于蠶的親水性天然高分子蛋白，主要作用是包裹在兩條絲素纖維外面起粘合作用。作為天然高分子聚合物，具有良好的生物相容性、低免疫原性，并可起到細(xì)胞因子的作用等優(yōu)點。
　　 本文旨在通過靜電紡絲技術(shù)制備聚己內(nèi)酯(PCL)/絲膠蛋白(SS)納米三維多孔支架，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞與材料的相互作用。本文包含如下具體研究內(nèi)容：
　　 1. 納米纖維支架的制備：直接從五齡幼蠶體內(nèi)提取絲膠蛋白，將凍干的絲膠蛋白用

3、9.3M LiBr溶解，通過透析、冷凍干燥獲得絲膠粉末。以HFIP為溶劑將凍干的絲膠蛋白溶解，最終制成5％（w/v)的溶液。以HFIP為溶劑的10％（w/v)的PCL溶液也同時制備。將絲膠蛋白溶液緩慢加入到PCL溶液中，制成4種不同質(zhì)量百分比的混合溶液，通過靜電紡絲技術(shù)制備納米纖維薄膜。
　　 2. 形態(tài)及理化性能檢測：利用掃描電鏡(SEM)、透射電鏡(TEM)、傅里葉紅外光譜技術(shù)(FTIR)、接觸角儀等手段對其結(jié)構(gòu)和性能進(jìn)行了

4、表征。結(jié)果表明，所制備的含SS納米顆粒的PCL/SS納米纖維支架呈相互交聯(lián)的多孔網(wǎng)狀無紡結(jié)構(gòu)，纖維直徑均一度與精細(xì)度高，且其中SS二級結(jié)構(gòu)沒有發(fā)生變化。
　　 3. 細(xì)胞與支架復(fù)合培養(yǎng)觀察：取人皮膚成纖維細(xì)胞(FEK4)與支架復(fù)合培養(yǎng)，SEM和MTS法觀察了細(xì)胞在材料上的粘附與增殖情況。結(jié)果表明，培養(yǎng)在納米纖維上的細(xì)胞粘附情況良好，并且與纖維緊密相連，說明此材料的細(xì)胞親和性良。細(xì)胞在PCL/SS纖維膜上也表現(xiàn)了良好的增殖性能，提