聚己內(nèi)酯—?dú)ぞ厶庆o電紡絲納米纖維支架與聚乳酸—羥基乙酸—?dú)ぞ厶庆o電紡絲納米纖維支架同雪旺細(xì)胞的生物相容性研究.pdf

1、本研究分為二部分：
　　第一部分：FK506-殼聚糖神經(jīng)導(dǎo)管治療正中神經(jīng)缺損的研究
　　目的：通過應(yīng)用FK506-殼聚糖神經(jīng)導(dǎo)管治療正中神經(jīng)缺損，驗(yàn)證該產(chǎn)品的安全性以及預(yù)后療效。
　　方法：將2010年1月至2013年1月大連醫(yī)科大學(xué)附屬一院手顯微外科急診平診9例中正神經(jīng)損傷的患者應(yīng)用FK506-殼聚糖神經(jīng)導(dǎo)管進(jìn)行手術(shù)治療，手術(shù)指征包括發(fā)生正中神經(jīng)完全離斷，缺損程度在10mm-30mm的患者。術(shù)后隨訪3個(gè)月至18個(gè)月。

2、記錄受手術(shù)運(yùn)動(dòng)感覺開始恢復(fù)時(shí)間以及創(chuàng)口愈合等級(jí);BMRC運(yùn)動(dòng)感覺評(píng)價(jià);兩點(diǎn)辨別覺以及手部肌肉形態(tài)。
　　結(jié)果：應(yīng)用FK506-殼聚糖神經(jīng)導(dǎo)管術(shù)后創(chuàng)口Ⅰ/甲級(jí)愈合，局部無過敏以及炎癥反應(yīng);運(yùn)動(dòng)感覺開始恢復(fù)時(shí)間均為4周左右。術(shù)后隨訪BMRC優(yōu)良率為77.78％，其中優(yōu)5例，良2例，可2例。兩點(diǎn)辨別覺＞5mm的患者占77.78％。術(shù)后大魚際肌均無明顯萎縮。
　　結(jié)論：FK506-殼聚糖神經(jīng)導(dǎo)管安全無毒，應(yīng)用FK506-殼聚糖神經(jīng)導(dǎo)

3、管手術(shù)治療正中神經(jīng)10mm-30mm缺損，術(shù)后患肢的運(yùn)動(dòng)和感覺功能的恢復(fù)取得令人滿意的效果。
　　第二部分：聚己內(nèi)酯-殼聚糖靜電紡絲納米纖維支架與聚乳酸-羥基乙酸-殼聚糖靜電紡絲納米纖維支架同雪旺細(xì)胞的生物相容性研究
　　背景：隨著神經(jīng)組織工程的發(fā)展，具有優(yōu)秀生物相容性和降解性的混紡生物支架材料接種種子細(xì)胞修復(fù)神經(jīng)缺損成為研究熱點(diǎn)。靜電紡絲技術(shù)制備的混紡支架材料，孔隙率高，比表面積大，不僅克服了單一支架材料的機(jī)械強(qiáng)度低、親水

4、性差、降解速度不易調(diào)控的缺點(diǎn)，還提高了與種子細(xì)胞的親和力。
　　目的：利用靜電紡絲技術(shù)制備納米級(jí)聚己內(nèi)酯-殼聚糖(PCL/CS)與聚乳酸-羥基乙酸-殼聚糖(PLGA/CS)兩種共聚支架材料，分析力學(xué)強(qiáng)度、孔隙率以及親水性，研究其與雪旺細(xì)胞(Schwanncell，SC)在體外共培養(yǎng)的生物相容性并進(jìn)行比較。
　　方法：1、靜電紡絲技術(shù)制備兩種混紡支架材料；2、體外分離培養(yǎng)雪旺細(xì)胞；3、觀察并鑒定雪旺細(xì)胞；4、雪旺細(xì)胞在兩種支架

5、材料上體外共培養(yǎng)后，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)和分布情況；5、cck-8方法測(cè)定雪旺細(xì)胞與各濃度支架材料浸提液中隨時(shí)間變化的吸光度(OD)值，檢測(cè)支架材料毒性；6、流式細(xì)胞術(shù)FITC-AnnexinV/PI檢測(cè)兩種支架材料上雪旺細(xì)胞凋亡率；7、測(cè)定雪旺細(xì)胞與兩種支架材料的細(xì)胞粘附率；8、cck-8方法測(cè)定與兩種支架材料共培養(yǎng)的雪旺細(xì)胞的增殖率。
　　結(jié)果：1、靜電紡絲方法成功制備PCL/CS與PLGA/CS兩種孔隙率高、親水性良好、力學(xué)強(qiáng)度強(qiáng)的

6、兩種共聚支架材料；2、成功地分離培養(yǎng)出增殖狀態(tài)的純凈雪旺細(xì)胞；3、雪旺細(xì)胞在兩種共聚支架材料成簇有一定方向的生長(zhǎng)，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，在支架材料上充分伸展，與紡絲相融合；4、經(jīng)cck-8檢測(cè)，雪旺細(xì)胞在不同濃度實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組浸提液中生長(zhǎng)良好，第5天為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，OD值均隨時(shí)間延長(zhǎng)增大，同組間各時(shí)間點(diǎn)比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著(p<0.05)；同實(shí)驗(yàn)組各濃度、各時(shí)間點(diǎn)比較，無顯著差異(p>0.05)；兩種支架材料均無毒性；5、經(jīng)FITC-Annexi

7、nV/PI檢測(cè)，兩實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組凋亡率均<10%，無顯著差異(p>0.05)；6、PLGA/CS組與雪旺細(xì)胞的粘附率高于PCL/CS與對(duì)照組，差異顯著(p<0.05)；PCL/CS組與對(duì)照組無明顯差異(p>0.05)；7、雪旺細(xì)胞在PLGA/CS組的增殖率(129.09%)高于PCL/CS(101.41%)，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著(p<0.05)；PCL/CS組與對(duì)照組無明顯差異(p>0.05)。
　　結(jié)論：靜電紡絲制備的PCL/CS與P