類細(xì)菌素產(chǎn)生菌篩選及類細(xì)菌素粗品對(duì)冷卻豬肉防腐效果的研究.pdf

1、本研究從湛江海域8種魚的腸道和腮中分離共附生微生物，利用牛津杯法從中篩選抗菌活性菌株，并對(duì)高活性、抗菌譜廣的菌株進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定及系統(tǒng)發(fā)育分析。通過(guò)對(duì)抑菌物質(zhì)酸排除、過(guò)氧化氫物排除實(shí)驗(yàn)，以及蛋白酶敏感實(shí)驗(yàn)篩選類細(xì)菌素產(chǎn)生菌，并進(jìn)行多相分類鑒定。對(duì)類細(xì)菌素產(chǎn)生菌的生物學(xué)特性及類細(xì)菌素的特性進(jìn)行研究，同時(shí)對(duì)該類細(xì)菌素粗品進(jìn)行冷卻肉防腐保鮮效果的研究。主要研究結(jié)果如下：
　　(1)共分離到的277株共附生微生物，其中63株菌顯示了抗菌

2、活性，占總菌數(shù)的22.7％；22株典型活性菌株分子生物學(xué)鑒定及系統(tǒng)發(fā)育分析表明：6株是Baclliusspp.，比例最高；2株是 Psuedomnoas spp.；3株是Lactobacillus spp.；2株是 Psychrobacterspp.；剩下9株分別為Pseudoalteromonas sp.、MicTococcus sp、.Rothia sp.、Citrobactersp、Cobetia sp.、Paracoccus s

3、p.、Staphylococcus sp.、Brevibacterium sp.以及Brachybacterium sp.，其中ZJHD2-58、ZJHD5-23及ZJHD2-31這3株菌可能是潛在的微生物新物種。
　　(2)菌株ZJHD3-06發(fā)酵液抑菌作用在排除酸性產(chǎn)物和過(guò)氧化氫的干擾后，對(duì)單核增生李斯特菌的抑制作用基本不變，但分別經(jīng)過(guò)胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K及木瓜蛋白酶處理后，蛋白酶解發(fā)酵液對(duì)單核增生李斯特菌的抑制作用比

4、未經(jīng)蛋白酶處理的均有明顯的下降，甚至消失，表明該菌株產(chǎn)生具有抑菌活性的蛋白或多肽類物質(zhì)，屬于類細(xì)菌素。
　　(3)菌株ZJHD3-06經(jīng)多相分類鑒定，確定該菌為解淀粉芽胞桿菌Bacillusamyloliquefaciens。
　　(4)對(duì)菌株ZJHD3-06類細(xì)菌素粗品的生物學(xué)特性研究表明，菌株發(fā)酵液在硫酸銨飽和度為60％時(shí)析出抗菌蛋白或多肽最多；其類細(xì)菌素粗品具有相當(dāng)好的熱穩(wěn)定性，在80℃處理15min活性僅下降了2.2

5、0％；pH對(duì)抗菌活性物質(zhì)影響顯著，但 pH為6.0左右時(shí)活性不受影響，pH過(guò)小或過(guò)大均對(duì)抗菌活性物質(zhì)影響較大；對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌以及真菌均具有抑菌作用，抑菌譜廣。
　　(5)對(duì)菌株ZJHD3-06類細(xì)菌素粗品保鮮應(yīng)用的初步研究結(jié)果表明，菌株ZJHD3-06類細(xì)菌素粗品對(duì)冷卻豬肉具有明顯的保鮮作用，且效果要優(yōu)于Nisin，可使冷卻豬肉的保質(zhì)期延長(zhǎng)6-9d；對(duì)冷卻肉中潛在致病菌單增李斯特菌有較好的抑制效果，可在短期內(nèi)防止冷卻