黑曲霉UB52產(chǎn)植酸酶及酶學(xué)特性研究.pdf

1、該文對黑曲霉進(jìn)行誘變及誘變菌株的最佳產(chǎn)植酸酶條件優(yōu)化、產(chǎn)酶動力學(xué)、植酸酶的純化和酶學(xué)性質(zhì)的研究;對植酸酶的最佳包被條件及其體外消化實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了探討.以黑曲霉S306為出發(fā)菌株,采用紫外、溴化乙錠以及兩者的復(fù)合誘變,經(jīng)多輪誘變得到一株液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)酶活力為4700u/ml的菌株(UB52),其遺傳性狀穩(wěn)定.在獲得到誘變菌株(UB52)最佳發(fā)酵營養(yǎng)條件的基礎(chǔ)上,對三角瓶和10L罐中的最佳培養(yǎng)條件進(jìn)行研究.10L罐在最佳條件下生物量達(dá)1.19g干重

2、/100ml發(fā)酵液,最高酶活達(dá)到5800u/ml發(fā)酵液,并建立發(fā)酵動力學(xué)模型預(yù)測發(fā)酵過程.對黑曲霉UB52液態(tài)發(fā)酵所產(chǎn)粗酶采用Sephadex G-100凝膠層析和DEAE-52離子交換柱層析分離,得到純化的酶,經(jīng)SDS-PAGE檢驗(yàn)為單一譜帶,相對分子量為63KD,該植酸酶的等電點(diǎn)pI為4.5,以植酸鈉為底物的米氏常數(shù)Km為0.31mmol/L.植酸酶氨基酸分析結(jié)果顯示含酸性氨基酸多,堿性氨基酸少,這和其等電點(diǎn)偏酸性是一致的.以微孔淀