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文檔簡介
1、自摻雜聚苯胺由于其特殊的結(jié)構(gòu)(主鏈一般是由單雙鍵交替的共軛π鍵組成),以及獨(dú)特的“摻雜”機(jī)制,自身可以發(fā)生氧化還原反應(yīng)等而被廣泛用于DNA電化學(xué)檢測。本論文從電化學(xué)方法制備自摻雜聚苯胺作為DNA雜交檢測的平臺、基于自摻雜聚苯胺與單雙鏈:DNA作用方式差異以提高DNA雜交檢測的信號等方面進(jìn)行了初步探討,主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
(1)在最優(yōu)化條件下,采用脈沖恒電位法制備了聚m-氨基苯磺酸(PABSA)/TiO2納米薄片,基于二者相
2、互作用,有效提高了單體聚合效率,增加了復(fù)合膜的活性位點(diǎn)。基于?;冉宦?lián)反應(yīng),氨基修飾的探針DNA可成功共價固定到活化的磺酸基團(tuán)上,在探針DNA固定后,中性環(huán)境中此納米薄片的電化學(xué)交流阻抗值增加,而在探針DNA修飾薄片與互補(bǔ)。DNA雜交后,修飾電極的阻抗值較雜交前明顯降低,根據(jù)阻抗值的變化能有效區(qū)分雙堿基錯配及非互補(bǔ)DNA序列,基于此成功實(shí)現(xiàn)了對花椰菜花葉病毒35S啟動子基因序列的無指示劑電化學(xué)檢測。
(2)基于π鍵堆積、靜
3、電作用及吸附效應(yīng)等,構(gòu)建了共軛自摻雜的聚苯胺(SPAN)-Al(Ш)-DNA高靈敏識別界面,并基于SPAN自身信號放大機(jī)制實(shí)現(xiàn)了免標(biāo)記DNA電化學(xué)雜交檢測。由于單鏈DNA(ssDNA)和雙鏈DNA(dsDNA)自身性質(zhì)如剛性、堿基堆積、電荷分布及長程電子傳遞等的差異,相比于與ssDNA結(jié)合,SPAN與dsDNA結(jié)合后將會發(fā)生構(gòu)型、界面及電化學(xué)性能的變化,這些變化可以通過電化學(xué)方法技術(shù)進(jìn)行捕捉轉(zhuǎn)換為電化學(xué)信號用于指示DNA的雜交反應(yīng),而不
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