具有血清穩(wěn)定性的ε-Ply-DMA-MPD刷型轉(zhuǎn)基因載體.pdf

1、復(fù)合物的血液輸送穩(wěn)定性是影響陽離子載體體內(nèi)轉(zhuǎn)染效率的重要因素。本論文利用原子轉(zhuǎn)移自由基聚合(ATRP)方法合成了聚甲基丙烯酸-N，N'-二甲氨基乙酯-b-3-(甲基丙烯酰胺)丙基-二甲基(3-磺丙)胺(PMPDSAH-b-PMPDSAH)雙嵌段共聚物修飾的多聚賴氨酸刷型非病毒載體(Ply-DMA-MPD)。瓊脂糖凝膠電泳實驗表明,與 PDMAEMA均聚物修飾的多聚賴氨酸刷型陽離子載體(Ply-DMA70)相比,PMPDSAH鏈段的引入雖

2、然使載體對質(zhì)粒 DNA的壓縮能力有輕微的下降,但是由于PMPDSAH鏈段的反聚電解質(zhì)作用,有效地提高載體/DNA復(fù)合物在肝素鈉溶液中的穩(wěn)定性。
　　PEI25k和Ply-DMA70兩種載體在50％血清濃度下的轉(zhuǎn)染效率較無血清時的轉(zhuǎn)染效率有明顯的降低;而Ply-DMA70-MPDp載體在不同血清條件下的轉(zhuǎn)染效率相對比較穩(wěn)定,在血清濃度為50%時的轉(zhuǎn)染效率與無血清時相比僅是略有下降。同時在50%的血清濃度下,Ply-DMA70-MPD

3、20載體在最佳復(fù)合比下的轉(zhuǎn)染效率是 PEI25k的10倍。而通過將DMAEMA和MPDSAH兩種單體同時投料,所得到的PDMAEMA-r-PMPDSAH無規(guī)共聚物修飾的?-多聚賴氨酸刷型載體(Ply-DMA70-r-MPD20),由于其側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的無規(guī)性,不能使 PMPDSAH鏈段有效地暴露在復(fù)合物周圍,因此不具有良好的抗血清能力。MTT細(xì)胞毒性實驗表明,由于PMPDSAH鏈段對正電荷的屏蔽作用,Ply-DMA70-MPDp載體的毒性要明