去鐵蛋白為模板和載體的納米合成及其在生物分子檢測中的應(yīng)用研究.pdf

1、近年來,以蛋白質(zhì)為模板合成納米材料引起了人們濃厚的研究興趣。此方法合成的材料既具有納米材料的特性,又具有蛋白質(zhì)的生物相容性,在生物分子固定化、食品工業(yè)、生物傳感等方面均展現(xiàn)出其優(yōu)勢。本論文以納米去鐵蛋白為模板,合成了納米金屬硫化物,并以去鐵蛋白為生物載體,制備出葡萄糖氧化酶-生物素/鏈霉親和素/生物素-去鐵蛋白(Apo-GOx)酶納米復(fù)合材料,成功用于低濃度的葡萄糖和凝血酶的檢測。主要工作如下:
　　 1.對鐵蛋白和去鐵蛋白的結(jié)

2、構(gòu)與特性、納米材料特性及其蛋白模板合成方法、酶固定方法及適配體生物傳感技術(shù)進(jìn)行簡要綜述,并在此基礎(chǔ)上提出本論文的基本構(gòu)思。
　　 2.以去鐵蛋白為反應(yīng)器,在水相中利用擴(kuò)散法合成粒徑大小一致、具有電化學(xué)性質(zhì)的納米金屬硫化物。采用透射電子顯微鏡表征其粒度、形貌和結(jié)構(gòu),采用差分脈沖伏安(DPV)法對金屬離子進(jìn)行電化學(xué)檢測,并分別計算出每個去鐵蛋白空殼中鋅離子和鎘離子的平均容納量。對裝載金屬硫化物的去鐵蛋白納米粒子進(jìn)行表面醛基修飾,并采

3、用消色品紅分光光度法對醛基進(jìn)行定量分析。醛基修飾后的裝載金屬硫化物的去鐵蛋白納米粒子可作為生物探針,在化學(xué)、生物、醫(yī)藥等方面可得到應(yīng)用,裝載多組分金屬硫化物的去鐵蛋白納米粒子有望作為多信號生物標(biāo)記探針用于生物分子檢測。
　　 3.利用鏈霉親和素與生物素之間的生物親和作用,以鏈霉親和素為鏈接分子,去鐵蛋白為生物載體,合成葡萄糖氧化酶-生物素/鏈霉親和素/生物素-去鐵蛋白酶納米復(fù)合材料(Apo-GOx),通過透射電鏡、紫外光譜和熒光