苯脲類(lèi)除草劑伏草隆免疫檢測(cè)方法的研究.pdf

1、伏草隆為內(nèi)吸選擇性土壤處理使用除草劑，屬于苯脲類(lèi)除草劑，這類(lèi)農(nóng)藥可由地表徑流，進(jìn)入地下水和土壤，容易造成地下水和土壤污染。本實(shí)驗(yàn)成功的合成了伏草隆半被原、人工免疫原、酶標(biāo)抗原、包被抗原，并利用伏草隆人工免疫原制備了具有的高特異性的苯脲類(lèi)除草劑伏草隆的多克隆抗體。本實(shí)驗(yàn)對(duì)伏草隆的免疫分析方法進(jìn)行了深入系統(tǒng)的研究，利用得到的多克隆抗體建立了兩種簡(jiǎn)便、快速、實(shí)用的伏草隆免疫分析方法—直接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法(ELISA)和免疫層析試紙條方法(

2、GICA)。
　　ELISA方法的靈敏度(IC50)為0.58±0.011μg/L，最低檢出限(IC15)為0.08±0.021μg/L。除了與草不隆的交叉反應(yīng)率為69.4％以外，與其他苯脲類(lèi)除草劑交叉反應(yīng)均較小。實(shí)驗(yàn)中選擇了海河水、井水、自來(lái)水和土壤作為檢測(cè)樣品，通過(guò)優(yōu)化條件消除基質(zhì)影響，確定了樣品的前處理方法，對(duì)樣品進(jìn)行了添加回收實(shí)驗(yàn)，ELISA方法的回收率在70～120％之間，變異系數(shù)在3.68～17.90％之間。此外，本實(shí)

3、驗(yàn)采用高效液相方法對(duì)ELISA方法進(jìn)行了驗(yàn)證，其相關(guān)性方程為y=1.124x+0.056，相關(guān)系數(shù)r2為0.986，充分說(shuō)明了建立的伏草隆直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和有效性。
　　免疫層析試紙條的方法檢出限20μg/L，選取海河水、自來(lái)水、井水陰性水樣作為檢測(cè)樣品，分別添加5、10、20μg/L的伏草隆標(biāo)準(zhǔn)品，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過(guò)濾后直接上樣，經(jīng)免疫層析試紙條和ELISA檢測(cè)，結(jié)果一致性良好，驗(yàn)證了免疫層析試紙條方法的