莫西沙星在中國健康受試者體內(nèi)的藥代動力學(xué)及在全面QT試驗中作用的研究.pdf

1、第一、二部分莫西沙星人體內(nèi)定量分析方法的建立及其在中國健康受試者體內(nèi)的藥代動力學(xué)試驗
　　 目的：
　　 本試驗研究擬建立測定人體內(nèi)血漿中莫西沙星含量的高效液相色譜-質(zhì)譜串聯(lián)法(LC-MS/MS)定量分析方法，并且測定48名健康受試者連續(xù)四天單劑量口服400mg莫西沙星片后的血藥濃度，從而進行藥代動力學(xué)分析，為臨床合理用藥提供充分理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 采用甲醇沉淀蛋白法對血漿中的待測藥物莫西沙星

2、和內(nèi)標左氧氟沙星進行提取，用ZORBAXEP-C18(4.6×100mm，5μm粒徑)色譜柱進行色譜分離，流動相為甲醇:水（50∶50，v/v），流速為0.2mL·min-1;進樣量為10μL;柱溫為25℃。質(zhì)譜監(jiān)測系統(tǒng)采用ESI（電噴霧離子化源）正離子檢測模式，在MRM（多重反應(yīng)監(jiān)測）模式下，莫西沙星和左氧氟沙星的定量離子對分別為m/z402.1→m/z384.3(F=120V,CE=25)和為m/z362.4→m/z261.2(F=

3、135,CE=35)。根據(jù)FDA生物樣品分析方法學(xué)指南，考察莫西沙星血漿樣品的方法學(xué)特異性、精密度、準確度、線性、定量下限、生物基質(zhì)效應(yīng)、穩(wěn)定性和回收率等，本實驗研究對該方法進行了完整的方法學(xué)確證。
　　 試驗中48名健康受試者分別連續(xù)四天單劑量口服400mg莫西沙星后，在給藥周期的給藥的第二、三天分別留取給藥前(0h)和給藥后(1.5h)，第四天留取給藥前(0h)和給藥后不同時間點(給藥后0.5h，1h，1.5h，2h，3h，

4、4h，6h，9h，12h，24h)的前臂靜脈留置針采集血液標本4mL，應(yīng)用本研究建立的分析方法測定給藥后不同時間點莫西沙星的血藥濃度，用WinNonlin(Phoenix)5.2.1軟件進行統(tǒng)計分析處理，采用非房室模型法評估各項藥代動力學(xué)參數(shù)。
　　 結(jié)果：
　　 本試驗建立了測定人血漿中莫西沙星含量的LC-MS/MS分析方法，并且進行了連續(xù)四天單劑量口服莫西沙星400mg的人體藥代動力學(xué)研究。
　　 本方法的線

5、性范圍為50～10000ng·mL-1，最低定量限(LLOQ)為50ng·mL-1，提取回收率在85.76％～105.36％之間，準確度在80.56％～116.17％之間，日內(nèi)、日間精密度（RSD）分別小于5.76％和8.75％;樣品前處理方案能夠?qū)Υ郎y物莫西沙星和左氧氟沙星進行有效提取，并且基質(zhì)效應(yīng)較小;線性范圍內(nèi)，血漿中無內(nèi)源性物質(zhì)干擾;在實驗方案中設(shè)定的各種考察條件下，莫西沙星均有較好的穩(wěn)定性。方法學(xué)確證結(jié)果表明，該分析方法符合S

6、FDA生物樣品分析方法有關(guān)指南相關(guān)要求，適用于莫西沙星人體藥代動力學(xué)研究。48名健康受試者口服莫西沙星后的主要藥代動力學(xué)參數(shù)如下:AUC0-24(58242.84±18213.18)ng·h·mL-1，AUC0-∞(78263.58±25394.13)ng·h·mL-1,T1/2(11.71±3.53)h,Cmax(5158.99±1918.38)ng·mL-1,Tmax(74.94±1.41)h,MRT0-24(18.02±4.45)

7、h,CLz/F(8420.09±7524.04)mL·h-1，Ke（0.06±0.2）。受試者連續(xù)四天口服莫西沙星400mg是安全的，可耐受的。
　　 結(jié)論：
　　 本研究建立的LC-MS/MS法可用于莫西沙星的藥代動力學(xué)研究。我國48例健康志愿者連續(xù)單劑量口服莫西沙星具有血藥峰濃度高、半衰期長、耐受性好的特點，單劑量口服400mg莫西沙星可達到并維持有效血藥濃度。
　　 第三部分莫西沙星在全面QT試驗中作用的研

8、究
　　 目的：
　　 與安慰劑比較，在健康受試者中評價莫西沙星(400mg，QD)單次給藥和連續(xù)給藥的穩(wěn)態(tài)血藥濃度對QT/QTc間期和心律的影響。評價莫西沙星在受試者體內(nèi)連續(xù)給藥的心臟毒性，以期對莫西沙星進行安全性研究全面了解和不斷完善，及時調(diào)整臨床給藥策略，為臨床用藥提供試驗依據(jù)。并為其在全面QT研究中作為陽性對照藥提供參考和依據(jù)，同時為國內(nèi)臨床研究中心進行TQT研究的驗證方法和TQT實驗方案設(shè)計及結(jié)果評估等方面提供

9、借鑒和參考。
　　 方法：
　　 按照ICHE14原則，在健康志愿者體內(nèi)進行連續(xù)四天口服400mg莫西沙星和安慰劑對QT/QTc間期影響的臨床試驗研究。共入選48名受試者，男女各半，分6組，每組8例。隨機編盲，根據(jù)性別分層，采用DAS統(tǒng)計軟件包按1∶1∶1∶1的比例產(chǎn)生隨機編碼。
　　 所有受試者按隨機碼指定的給藥順序分別接受研究藥物和安慰劑，間隔清洗期五天（以前一個周期研究的結(jié)束日計算）。為了解QT/QTc間期

10、和心律的變化及與藥物血藥濃度的相關(guān)關(guān)系，在進行QT/QTc間期和心律影響評價的同時，采集一定時間點的血藥濃度，觀察藥代動力學(xué)參數(shù)以及藥物濃度與QT/QTc間期的關(guān)系。
　　 在整個研究過程中，每位受試者每次在臥位靜息5分鐘后進行描記，連續(xù)描記3次，每次描記至少5次完整的心跳，至少描記10s。同時做長Ⅱ?qū)?lián)ECG描記。如與采血時間沖突，先描記心電圖，再采血。心電圖描記參數(shù)必須一致。心電圖分析方法為機器分析。
　　 本臨床試

11、驗所有數(shù)據(jù)采用WinNonlin5.2.1(Phoenix)軟件計算分析藥代動力參數(shù)，SPSS17.0軟件分析數(shù)據(jù)。
　　 結(jié)果：
　　 48例受試者中，其平均年齡為24.88±2.94歲，平均身高為165.47±8.08厘米，平均體重為59.28±7.74kg，平均BMI為21.58±1.62。比較每例受試者給藥前后的生命體征測量結(jié)果，沒有發(fā)現(xiàn)具有臨床意義的改變，受試者心率沒有明顯改變。①機讀QT/QTc間期結(jié)果分析:

12、分析給藥四天后穩(wěn)態(tài)血藥濃度時ΔΔQTcF，給藥后2-4小時達到最大對比時間平均QTc作用，95％CI為[15.07，0.25]，判定本次QT研究結(jié)果為陽性;②等級分類結(jié)果分析，給藥第1至4天后，莫西沙星組的QTcF間期(ms)與基線（給藥后-基線）比較，莫西沙星組有23例QTcF間期的改變在＞30-60ms;莫西沙星組沒有QTcF間期改變在＞60ms。機讀QT/QTc絕對時間分析結(jié)果顯示，共25例受試者給藥前/后和/或后的QT延長超過4

13、50ms，但均在正常范圍內(nèi)，不會危及生命。
　　 在整個試驗研究過程中共有19人次受試者出現(xiàn)不良事件，主要表現(xiàn)為頭暈、惡心、嘔吐、血糖降低、過敏、AST或ALT升高、竇性心動過緩及QTc間期延長等，除一例受試者發(fā)生過敏反應(yīng)與研究藥物有關(guān)外，其余的不良事件均可考慮不能排除與研究藥物的關(guān)系。通過對血藥濃度和QTc相關(guān)性分析，結(jié)果表明莫西沙星與QTc間期之間沒有明顯的相關(guān)性。
　　 結(jié)論：
　　 莫西沙星可以引起受試者