產(chǎn)PHA和polyP細(xì)菌的篩選及一株芽孢桿菌利用乳品廠(chǎng)廢水生成PHB的研究.pdf

1、聚羥基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoate，PHA)是一種在眾多的原核微生物中都有發(fā)現(xiàn)的胞內(nèi)聚集物，通常當(dāng)環(huán)境中的碳源充足而其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)相對(duì)缺乏的情況下可以產(chǎn)生。PHA具有生物相容性和一些傳統(tǒng)塑料的性質(zhì)，是一種生物可降解材料，近年來(lái)逐漸成為新型聚合高分子材料相關(guān)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。目前生產(chǎn)PHA的主要方法是利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)，但其成本很高，這阻礙了PHA的廣泛使用。篩選高產(chǎn)菌種和尋求廉價(jià)發(fā)酵原料是解決這一問(wèn)題的主要途徑。聚磷微

2、生物（Phosphorus accumulating organisms，PAOs）是一類(lèi)可以過(guò)量的從外界吸收超出自身生理需要量的可溶性磷酸鹽、形成多聚磷酸鹽(Inorganicpolyphosphate，polyP)的微生物。其可降低環(huán)境中磷含量、起到治理水體富營(yíng)養(yǎng)化作用。水生生態(tài)系統(tǒng)是產(chǎn)PHA和polyP細(xì)菌的重要來(lái)源。而內(nèi)蒙古高原湖泊眾多，但是目前對(duì)其中產(chǎn)PHA和polyP的相關(guān)研究尚還很缺乏。
　　本研究利用純培養(yǎng)方法，從

3、內(nèi)蒙古高原五個(gè)湖泊中采集水樣分離細(xì)菌，以尼羅藍(lán)染色PHA和DAPI染色polyP的方法篩選產(chǎn)PHA菌和聚磷菌，并對(duì)其中一株高產(chǎn)PHA菌50-47（Bacillus endophyticus）進(jìn)行了產(chǎn)PHA發(fā)酵條件優(yōu)化和胞內(nèi)PHA定性檢測(cè)。研究結(jié)果表明:分離純化獲得了288株細(xì)菌，其中23株產(chǎn)PHA，28株產(chǎn)polyP，12株既能合成polyp又能積累PHA。產(chǎn)PHA菌中有7株合成能力較強(qiáng)，聚磷菌中有10株合成能力較強(qiáng)。基于16S rDN

4、A序列比對(duì)的初步分類(lèi)鑒定表明，23株產(chǎn)PHA細(xì)菌中，屬于α-蛋白菌綱的有16株，屬于芽孢桿菌綱的有6株，還有1株屬于放線(xiàn)菌綱;28株有聚磷能力的細(xì)菌中，有9株分屬α-變形菌綱，8株分屬放線(xiàn)菌綱，6株分屬芽孢桿菌綱，3株分屬γ-變形菌綱，還有2株分屬異常球菌綱。定性分析表明，菌株50-47所產(chǎn)PHA為聚-β-羥基丁酸(PHB);1/2R2A培養(yǎng)基培養(yǎng)下，其胞內(nèi)PHB提取最佳時(shí)間為48h;而以乳品廠(chǎng)廢水培養(yǎng)下，該菌株可以大量合成PHB，且廢