基于主客體作用的細胞內(nèi)核酸鏈光控釋放的研究.pdf

1、基因治療在生物醫(yī)學和生物有機學領域有著廣闊的前景，基因沉默也有著重要的生物學意義?；蛑委燁I域的關鍵問題就是如何將外源核酸成功引入細胞以及在細胞內(nèi)如何可控、高效的釋放。目前，利用納米材料作為負載體，運載外源核酸進入細胞已經(jīng)獲得了很大的成功。本文主要研究了通過納米顆粒負載外源核酸進入細胞后，外源核酸鏈如何在細胞內(nèi)可控、高效釋放的方法。
　　 本文首先研究了基于環(huán)糊精和偶氮苯的主客體相互作用實現(xiàn)體外光調(diào)控細胞基因沉默。將巰基化的環(huán)糊

2、精修飾在金納米顆粒表面，在目標核酸鏈上標記偶氮苯分子。在可見光照射下偶氮苯為反式構(gòu)型，可以進入環(huán)糊精分子空腔，形成負載核酸鏈的金納米顆粒。利用金納米顆粒的生物相容性將核酸鏈負載進入細胞。通過紫外光的照射使偶氮苯的構(gòu)型發(fā)生變化，脫離環(huán)糊精分子的空腔，實現(xiàn)目標鏈的可控釋放，達到抑制綠色熒光蛋白表達的目的。
　　 其次，分析研究了基于二茂鐵的協(xié)同競爭作用實現(xiàn)體外光調(diào)控目標核酸鏈在細胞中的快速釋放。二茂鐵分子與環(huán)糊精的結(jié)合常數(shù)比偶氮苯與

3、環(huán)糊精的結(jié)合常數(shù)高一個數(shù)量級，因此在有二茂鐵分子存在的條件下，二茂鐵與環(huán)糊精的強結(jié)合力促進偶氮苯分子從環(huán)糊精中的釋放。當光照與二茂鐵同時存在時，外源核酸會在進入細胞后快速的釋放，縮短光照時間。
　　 最后，研究了基于核酸三鏈結(jié)構(gòu)的銀離子表面增強拉曼檢測。核酸單鏈能很好的穩(wěn)定金納米顆粒，核酸三鏈對金納米顆粒的穩(wěn)定性不強。銀離子能與兩個胞嘧啶作用形成配合物。溶液中沒有銀離子時，單鏈和雙鏈能很好的穩(wěn)定金納米顆粒。當加入銀離子后，單鏈通