固、液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)靈芝多糖的性質(zhì)、活性對比分析.pdf

1、分類號：Q815密級：(不保密)學(xué)校代碼：10057研究生學(xué)號：12809019固、液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)靈芝多糖的性質(zhì)、活性對比分析AComparativeStudyontheCharacterizationandAntioxidantActivityofGanodermalucidumPolysaccharidesProducedbySolidState，LiquidFermentation專業(yè)名稱：發(fā)酵工程指導(dǎo)教師姓名：賈士儒教授研究生姓名

2、：陶如玉申請學(xué)位級別：工學(xué)碩士論文提交日期：2015年6月論文課題來源：國家自然基金學(xué)位授予單位：天津科技大學(xué)摘要靈芝是一種珍貴的藥、食兩用真菌，具有補中益氣、滋補強體、延年益壽等功效。靈芝多糖是其主要活性成分，具有清除自由基、抗氧化、抗衰老和免疫調(diào)節(jié)等作用，其主要是從液態(tài)發(fā)酵的發(fā)酵液和固態(tài)發(fā)酵的子實體中提取得到的。本文初步研究了靈芝液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)胞外多糖的培養(yǎng)工藝，并對液態(tài)發(fā)酵胞外多糖(GLEP)與固態(tài)發(fā)酵子實體胞內(nèi)多糖(GSIP)的分離

3、純化、結(jié)構(gòu)性質(zhì)以及抗氧化、抗疲勞功能等方面進行了對比分析，主要研究結(jié)果如下：(1)通過單因素實驗和響應(yīng)面實驗對靈芝液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)胞外多糖的發(fā)酵工藝進行了優(yōu)化。實驗結(jié)果表明，產(chǎn)GLEP的最適培養(yǎng)基組成和培養(yǎng)條件是：葡萄糖39g／L、酵母粉21g／L、KH2P0430g／L、MgS047H2010g／L，初始pH60，接種量10％。在此發(fā)酵條件下實際的GLEP產(chǎn)量最大值為265g／L，接近預(yù)測值274g／L。(2)利用DEAE650離子交換樹脂

4、和葡聚糖凝膠G100樹脂對兩種多糖GLEP和GSIP進行分離純化，分別得到純度較高的單一組分GLEP1和GSIP1；紫外光譜和紅外光譜掃描結(jié)果顯示GLEP1和GSIP1均不含有核酸、蛋白質(zhì)和色素等雜質(zhì)，且在4000400cm1區(qū)間內(nèi)具有多糖類物質(zhì)的一般特征，均為p型吡喃多糖；GCMS分析結(jié)果表明GLEP1和GSIP1均由核糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖等7種單糖組成；HPGFC法測定結(jié)果顯示其分子量分別為2150Da

5、和2606Da。(3)采用DPPH和羥基自由基清除實驗、還原能力測定和酵母細(xì)胞氧化損傷模型等方法，考察了兩種粗多糖樣品GLEP和GSIP的體外抗氧化活性。結(jié)果表明：GLEP和GSIP均具有較高的抗氧化能力。GLEP和GSIP多糖樣品濃度為50mg／mL時，DPPH自由基的清除率分別為505％和855％，羥基自由基清除率分別為807％和783％，還原能力分別為125和146；樣品濃度為20mg／mL時，紫外損傷酵母細(xì)胞的存活率分別為571