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文檔簡介
1、衰老是每個人都要經(jīng)歷的生命過程。皮膚衰老是機體整體衰老過程的最早和最直觀地體現(xiàn)。目前,大多數(shù)學者認為過多的氧自由基是導致皮膚老化的主要原因之一。輔酶Q10(CoQ10)和α-硫辛酸(ALA)是兩種重要的抗氧化劑,具有較強的氧自由基清除能力。它們的水溶解性較差、化學性質(zhì)不穩(wěn)定和見光易分解等缺點限制了它們的應用范圍。由生理相容性的脂質(zhì)和表面活性劑制備的納米結(jié)構脂質(zhì)載體(NLC)可以負載脂溶性的活性成分,改善其水分散性和化學穩(wěn)定性,而且可以緩
2、慢釋放活性成分,并改善它們的生物利用度。
本研究利用高壓均質(zhì)法制備負載活性成分的納米結(jié)構脂質(zhì)載體水分散液。在成功制備CoQ10-NLC和ALA-NLC后,對其進行一系列的表征,并分析研究它們的表觀形貌。CoQ10-NLC的平均粒徑為101.6 nm,多分散指數(shù)(PDI)為0.139; ALA-NLC的平均粒徑為155.0 nm,多分散指數(shù)(PDI)為0.161。本研究證實了制備過程未對納米結(jié)構脂質(zhì)載體負載的活性成分的化學性質(zhì)產(chǎn)
3、生影響。另外,納米結(jié)構脂質(zhì)載體負載的活性成分的光穩(wěn)定性得到明顯改善。
通過研究負載活性成分的納米結(jié)構脂質(zhì)載體對細胞活力、細胞形態(tài)和細胞核形態(tài)的影響以及利用time-lapse成像實驗等多種途徑證實了其對HaCaT細胞沒有明顯的細胞毒性,表明它們具有較好的細胞相容性。Time-lapse成像系統(tǒng)實時、可視化地展示了CoQ10-NLC和ALA-NLC處理的HaCaT細胞的動態(tài)行為。
體外釋放研究發(fā)現(xiàn),納米結(jié)構脂質(zhì)載體負載
4、的活性成分能夠進行緩慢的釋放。通過對NLC體系中活性成分的體外釋放曲線進行擬合,并建立數(shù)學模型來闡釋活性成分的釋放機制。經(jīng)皮行為實驗證明,納米結(jié)構脂質(zhì)載體包裹活性成分后能夠明顯增加活性成分在皮膚內(nèi)的滯留量,而且活性成分沒有透過皮膚,從而避免了可能產(chǎn)生的全身性的不良反應。
對負載活性成分的納米結(jié)構脂質(zhì)載體進行的抗氧化功效研究表明,CoQ10-NLC和ALA-NLC具有對超氧陰離子、羥自由基和DPPH自由基的清除能力。本研究建立了
5、人永生化角質(zhì)形成細胞HaCaT細胞的氧化損傷模型。利用包括time-lapse成像實驗在內(nèi)的一系列方法,從細胞內(nèi)活性氧、抗氧化酶體系和脂質(zhì)過氧化等方面研究負載活性成分的納米結(jié)構脂質(zhì)載體對氧化損傷HaCaT細胞的保護作用,其保護機理主要為CoQ10-NLC和ALA-NLC可以增強氧化損傷細胞內(nèi)SOD和GSH-PX的活性,減少細胞內(nèi)MDA的含量,降低ROS水平,減輕活性氧自由基對細胞的氧化損傷。
ALA-NLC能夠抑制B16小鼠黑
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