三聚氰胺及其與三聚氰酸混合物對雄性小鼠生殖系統(tǒng)毒性和雄激素合成影響研究.pdf

1、2007-2008年間，不法廠商在寵物食品、嬰兒奶粉中非法添加三聚氰胺而引起大量貓、狗乃至嬰兒死亡的的惡性事件，引起了全球社會強烈反響，關于三聚氰胺及其同系物的毒性研究也從最初集中于腎臟毒性，逐漸擴展到消化系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等領域，目前對于其生殖系統(tǒng)尤其雄性生殖系統(tǒng)的研究主要集中于睪丸的形態(tài)學損傷，但相關報道支離破碎且缺乏相應調控機制的研究。本試驗主要研究三聚氰胺及其與三聚氰酸混合物對雄性小鼠睪丸形態(tài)、精子形態(tài)和數(shù)量以及雄激素的影

2、響，并對影響雄激素改變的調控機制進行了研究，以期為三聚氰胺及其同系物對雄性小鼠生殖毒性的作用提供更多的參考數(shù)據(jù)。
　　將70只ICR雄性小鼠隨機分為7組，每組10只，三聚氰胺低、中、高劑量組分別按2mg/kg/d、10mg/kg/d、50mg/kg/d灌胃，三聚氰胺和三聚氰酸混合物（1∶1等質量混合）低、中、高組分別按1mg/kg/d、5mg/kg/d、25mg/kg/d灌胃，陰性對照組灌胃等體積的玉米油，每天灌胃1次，連續(xù)28天

3、。實驗結束后稱取小鼠體重，取附睪和睪丸組織，計算附睪和睪丸系數(shù);附睪中分離精子進行附睪尾精子數(shù)量統(tǒng)計與精子形態(tài)學鑒定;HE染色觀察睪丸病理形態(tài)學變化;眼眶內采血并分離血清檢測睪酮含量;熒光定量PCR法檢測小鼠睪丸中與睪酮合成相關的關鍵酶的基因表達，免疫組織化學法檢測睪丸間質細胞數(shù)量變化。結果表明，三聚氰胺和三聚氰酸混合物高劑量組小鼠采食量明顯下降，被毛粗亂，行動遲緩，且有明顯拱背表現(xiàn)，三聚氰胺高劑量組、三聚氰胺和三聚氰酸混合物中劑量組小

4、鼠出現(xiàn)類似表現(xiàn)，但程度相對輕微，其他劑量組未出現(xiàn)異常;三聚氰胺和三聚氰酸混合高劑量組的體重明顯低于陰性對照組(p＜0.05)，其它各實驗組體重與陰性對照組無明顯差異(p＞0.05);三聚氰胺高劑量組和混合高劑量組睪丸相對重量明顯高于陰性對照組(p＜0.05)，但各組間睪丸的重量沒有顯著差異(p＞0.05);三聚氰胺及其與三聚氰酸混合物均可引起小鼠精子數(shù)量減少(p＜0.01)和精子畸形率升高(p＜0.01);三聚氰胺及其混合物造成生精細胞

5、的破壞，主要表現(xiàn)為生精細胞層數(shù)減少、排布散亂，部分精原細胞出現(xiàn)壞死，管腔中精子數(shù)量減少甚至消失;三聚氰胺及其與三聚氰酸混合物均可引起血清睪酮含量下降;三聚氰胺及其與三聚氰酸混合物明顯抑制了類固醇合成急性調節(jié)蛋白(StAR)、細胞色素P450膽固醇側鏈裂解酶(P450scc)和17β-羥類固醇脫氫酶(17β-HSD)的基因表達，與對照組相比差異顯著(p＜0.05)，隨著各組劑量的增加對其抑制作用更加明顯，而且三聚氰胺和三聚氰酸混合物對睪酮