乳酸菌發(fā)酵骨粉產(chǎn)品的研發(fā)及其補(bǔ)鈣成骨作用的研究.pdf

1、響應(yīng)自治區(qū)提出的綠色農(nóng)畜產(chǎn)品輸出基地建設(shè)與轉(zhuǎn)型升級(jí)的需要，開(kāi)發(fā)綠色無(wú)污染的高科技高端產(chǎn)品、增加畜產(chǎn)品附加值已成為當(dāng)務(wù)之急。以牛羊鮮骨為原料通過(guò)發(fā)酵研發(fā)補(bǔ)鈣又促成骨的純天然高端產(chǎn)品，提高畜牧資源的附加值，為民生健康做出貢獻(xiàn)。選用三種乳酸菌發(fā)酵牛羊鮮骨粉，使羥磷灰石的鈣以乳酸鈣形式釋放。經(jīng)牛羊鮮骨—粉碎-滅菌-發(fā)酵-總混-凍干-干法制粒-壓片制成生物活性制劑（產(chǎn)品），并在細(xì)胞，組織和動(dòng)物水平上驗(yàn)證了產(chǎn)品的功效。用濕灰法消化骨粉用EDTA滴定

2、方法測(cè)定總鈣含量，用EDTA滴定方法測(cè)定游離鈣，以平板傾注法測(cè)定活菌數(shù)。培養(yǎng)人成骨細(xì)胞hFOB并用產(chǎn)品刺激12 h后提取RNA在以熒光定量PCR檢測(cè)COLLAGEN, RANKL，OPG三種基因的表達(dá)。以切除卵巢的方法制作了骨質(zhì)疏松模型動(dòng)物，并用全自動(dòng)生化儀測(cè)定血清指標(biāo)，取股骨制作病理切片經(jīng)HE染色觀察大鼠骨質(zhì)疏松程度。灌胃給藥法研究個(gè)體水平上的功效，灌胃兩個(gè)月后動(dòng)脈取血測(cè)定血清生化指標(biāo)，再處死大鼠后取股骨制作病理切片HE染色觀察大鼠攝

3、取不同鈣產(chǎn)品后骨質(zhì)疏松程度。目前我們的產(chǎn)品已將不能吸收的羥磷灰石的37.61％轉(zhuǎn)化為可吸收的游離鈣（乳酸鈣）形式，即，游離鈣的含量增加了近20倍。并在骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型動(dòng)物水平上證明了補(bǔ)鈣又能促進(jìn)骨形成。還在細(xì)胞水平也初步證明該產(chǎn)品具有增加骨保護(hù)素表達(dá)和成骨作用。因此，本研究對(duì)于鈣補(bǔ)充、促進(jìn)骨形成及預(yù)防骨質(zhì)疏松癥都具有重要意義。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴乳酸菌發(fā)酵有效游離出骨粉中以羥磷灰石形式存在的結(jié)合鈣為乳酸鈣，乳酸鈣含量增加了