麻黃湯化學(xué)成分的解析及其譜效關(guān)系的研究.pdf

1、目的：
　　本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用譜-效結(jié)合方法，采用色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分離鑒別麻黃湯復(fù)方化學(xué)組分，并建立麻黃湯水煎液脂溶性和水溶性部位指紋圖譜，結(jié)合發(fā)汗、平喘藥效實(shí)驗(yàn)結(jié)果，采用偏最小二乘回歸（PLSR）法建立復(fù)方譜-效關(guān)系數(shù)學(xué)模型。揭示麻黃湯復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1、應(yīng)用氣相色譜電子轟擊離子源質(zhì)譜（GC-EI/MS）聯(lián)用技術(shù)建立41個(gè)麻黃湯不同劑量配比組水煎液脂溶性部位的指紋圖譜。比較色譜圖間差異，各共有峰質(zhì)譜圖通過

2、與NIST標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)比對(duì)明確其化學(xué)信息，并結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道分析成分的藥材歸屬。
　　2、應(yīng)用超高效液相色譜四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF/MS）聯(lián)用技術(shù)建立41個(gè)麻黃湯不同劑量配比組水煎液水溶性部位的指紋圖譜。比較色譜圖間差異，MZmine-2.9.1軟件自動(dòng)提取各共有峰的準(zhǔn)分子離子峰m/z值，通過與自建化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)中成分在[M+H]+模式下的m/z值進(jìn)行對(duì)比，明確其化學(xué)信息及藥材歸屬。
　　3、采用著色法研究麻黃湯不

3、同配比組水煎液及各單味藥材于40 min、60 min、80min、100 min、120 min對(duì)大鼠足趾汗腺分泌的影響，以汗液增加百分率為評(píng)價(jià)指標(biāo)；采用離體氣管螺旋條法研究麻黃湯不同配比組水煎液及各單味藥材對(duì)豚鼠離體氣管平滑肌的解痙作用，以解痙百分率為評(píng)價(jià)指標(biāo)。
　　4、以脂溶性和水溶性部位41張指紋圖譜中共有峰峰面積為自變量，以不同時(shí)間點(diǎn)大鼠足趾部汗滴數(shù)作為譜-效關(guān)系研究的因變量1，以豚鼠離體氣管平滑肌張力下降差值作為作為譜

4、-效關(guān)系研究的因變量2。應(yīng)用PLSR法，建立譜-效關(guān)系數(shù)學(xué)模型，根據(jù)得分圖中散點(diǎn)的分布情況對(duì)色譜峰進(jìn)行分類，根據(jù)載荷圖中自變量距原點(diǎn)的位置、權(quán)重系數(shù)的大小，篩選出與發(fā)汗、平喘顯著相關(guān)的特征峰，并明確其化學(xué)信息。
　　結(jié)果：
　　1、本文實(shí)驗(yàn)從麻黃湯脂溶性部位共鑒定出包括α-松油醇、肉桂醛、丁香醛、正丁醇等在內(nèi)的40個(gè)化學(xué)成分，其中主要為揮發(fā)油類成分，主要來(lái)源于麻黃和桂枝。
　　2、本文實(shí)驗(yàn)從麻黃湯水溶性部位共鑒定出包括

5、麻黃堿、桂皮酸、苦杏仁苷、甘草酸等在內(nèi)的39個(gè)化學(xué)成分，其中主要為來(lái)源于麻黃的生物堿類成分，來(lái)源于桂枝和苦杏仁的有機(jī)酸類成分，以及來(lái)源于甘草的黃酮類成分。
　　3、發(fā)汗實(shí)驗(yàn)和平喘實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，麻黃為影響全方藥效實(shí)驗(yàn)結(jié)果的最主要因素，對(duì)全方發(fā)汗、平喘有顯著的促進(jìn)作用。此外，桂枝和苦杏仁對(duì)全方發(fā)汗、平喘亦有一定的促進(jìn)作用，而甘草對(duì)全方發(fā)汗有一定的抑制作用。
　　4、麻黃湯水煎液與其發(fā)汗、平喘藥效的譜-效關(guān)系研究表明，主成分Com

6、p1~Comp4對(duì)發(fā)汗的解釋能力達(dá)到85.1％，主成分Co mp1~ Comp5對(duì)平喘的解釋能力達(dá)到85.8%，其中Comp1對(duì)模型的預(yù)測(cè)能力最強(qiáng)；主成分載荷圖中與發(fā)汗、平喘藥效實(shí)驗(yàn)結(jié)果關(guān)聯(lián)性較大的色譜峰主要來(lái)源于脂溶性指紋圖譜；共篩選121個(gè)色譜峰作為麻黃湯發(fā)汗作用的特征峰，21個(gè)色譜峰已確定結(jié)構(gòu)信息，180個(gè)色譜峰作為麻黃湯平喘作用的特征峰，20個(gè)色譜峰已確定結(jié)構(gòu)信息；其中有43個(gè)色譜峰對(duì)全方發(fā)汗、平喘均有調(diào)控作用。
　　結(jié)論

7、：
　　借助色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，開展了麻黃湯水煎液與其發(fā)汗、平喘藥效的譜效學(xué)研究。麻黃湯水煎液中共鑒定出79個(gè)化學(xué)成分，脂溶性部位主要為揮發(fā)油類成分，水溶性部位主要為生物堿、有機(jī)酸、黃酮類成分；篩選出121個(gè)色譜峰作為麻黃湯發(fā)汗作用的特征峰，180個(gè)色譜峰作為麻黃湯平喘作用的特征峰，其中43個(gè)峰為發(fā)汗、平喘藥效共同特征峰，特征峰中27個(gè)色譜峰已確定結(jié)構(gòu)信息；主成分載荷圖中對(duì)兩者藥效調(diào)控作用較大的成分主要分布于脂溶性部位，提示揮發(fā)油可