富含二硫鍵多肽-蛋白質(zhì)的化學(xué)合成新方法及其結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、近年來，多肽/蛋白質(zhì)類藥物由于具有靶向性強、藥效高、毒副作用低，在體內(nèi)易于代謝等特點受到了制藥領(lǐng)域的廣泛關(guān)注。其中毒素多肽/蛋白是一類富含二硫鍵的特殊功能多肽，主要是通過與細(xì)胞的特定受體蛋白（如通道蛋白）相互結(jié)合進(jìn)而發(fā)揮作用。這些受體蛋白通常都是重要的離子通道（膜蛋白），與細(xì)胞的增值分化乃至人類各種疾病密切相關(guān)。由于毒素蛋白是自然界長期進(jìn)化的產(chǎn)物，它們與特定受體結(jié)合的特異性和效率遠(yuǎn)超過人工通過高通量篩選得到的小分子化合物?；诖?，毒素多

2、肽/蛋白因具有良好的生物活性、極高的特異性而成為當(dāng)前多肽藥物開發(fā)的研究熱點。然而，由于毒素多肽/蛋白具有的特殊結(jié)構(gòu)，使用傳統(tǒng)的基因重組表達(dá)方法難以大量獲得具有正確結(jié)構(gòu)、功能的該類蛋白質(zhì)。近期興起的蛋白質(zhì)化學(xué)合成法則彌補了傳統(tǒng)方法中的這些問題，甚至在產(chǎn)量和效率上也都有明顯優(yōu)勢，蛋白質(zhì)的化學(xué)合成目前已被認(rèn)為是獲得多肽和蛋白質(zhì)的一種高效、有力的手段。本文作者運用多肽酰肼連接技術(shù)結(jié)合的多肽/蛋白質(zhì)固相合成策略，高效的合成了一系列富含二硫鍵的毒素

3、多肽（人源β防御素-4，μ-芋螺毒素SⅢA，以及海葵毒素肽APET×2），并使用優(yōu)化的條件成功將其復(fù)性，獲得了具有正確空間結(jié)構(gòu)的毒素肽。然而，由于毒素多肽富含多對二硫鍵的特性，使其天然的復(fù)性效率較低并難以分離純化。為解決該問題，我們運用了Tian課題組發(fā)明的以二氨基二酸替代多肽中二硫鍵的策略優(yōu)化毒素多肽的合成及復(fù)性。具體來說，使用二氨基二酸可以減少蛋白質(zhì)中二硫鍵的錯配進(jìn)而明顯提高合成及復(fù)性效率。使用該策略我們實現(xiàn)了Hepcidin衍生物