搭載klotho蛋白熱敏型聚合凝膠在內(nèi)鏡下治療胃潰瘍.pdf

1、目的：
　　1、探索klotho蛋白是否對(duì)GECs（胃上皮細(xì)胞）增殖率和遷移率有促進(jìn)作用；
　　2、制作一款包裹 klotho蛋白能用于內(nèi)鏡下的熱敏型聚合凝膠并對(duì)材料進(jìn)行評(píng)估；
　　3、通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證聚合凝膠對(duì)胃潰瘍的愈合是否有促進(jìn)作用。
　　方法：
　　1、細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)（EDU）和細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)（Transell）：將對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)的GECs分為klotho蛋白組和對(duì)照組，klotho蛋白組添加klotho，

2、觀察兩組細(xì)胞增殖率和遷移率有無(wú)差異。
　　2、聚合凝膠的制作及評(píng)估：以β-環(huán)糊精包裹klotho蛋白的制成納米微球，用殼聚糖、F-127、甘油等材料制作成一種溫度敏感性凝膠，納米微球與凝膠混合均勻后通過(guò)掃描電鏡觀察，并測(cè)定生物材料中klotho蛋白的緩釋速度。
　　3、胃潴留實(shí)驗(yàn)：將8只C57小鼠分為2組，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，分別灌入含1％亞甲藍(lán)的生理鹽水、klotho蛋白凝膠，在0、30、60、120分鐘后取胃，通過(guò)活體熒光成

3、像系統(tǒng)檢測(cè)熒光強(qiáng)度。
　　4、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：將60只SD大鼠隨機(jī)分為生理鹽水組，空白凝膠組，奧美拉唑組、klotho蛋白凝膠組4組。各組大鼠成模后每天分別用生理鹽水、空白凝膠、奧美拉唑、Klotho蛋白凝膠灌胃1次治療。在治療的第1、3、7天每組隨機(jī)處死5只大鼠取材，測(cè)量潰瘍面積及新生毛細(xì)血管數(shù)量。潰瘍標(biāo)本切片后行HE染色、PAS染色、PNCA染色，觀察各組組織學(xué)變化情況。
　　結(jié)果：
　　1、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：klotho蛋白組

4、的增值率是對(duì)照組的2.3倍，細(xì)胞遷移數(shù)量是對(duì)照組的3.6倍。
　　2、電鏡觀察結(jié)果：納米微球直徑在50-200nm之間，可見(jiàn)納米微球勻稱散布在klotho凝膠上面。
　　3、胃潴留實(shí)驗(yàn)：klotho凝膠的熒光的強(qiáng)度在每個(gè)時(shí)間段都明顯高于對(duì)照組。
　　4、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：klotho凝膠組愈合情況從肉眼觀和組織學(xué)角度都要優(yōu)于各個(gè)對(duì)照組。
　　結(jié)論：
　　1、證明了Klotho蛋白在酸性條件下能夠促進(jìn)GECs的增殖遷