BMS-345541對(duì)大鼠脊髓損傷后粒細(xì)胞浸潤(rùn)及運(yùn)動(dòng)功能影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究在大鼠急性脊髓損傷模型中，傷后早期硬膜下注射BMS-345541，觀察其對(duì)脊髓組織中粒細(xì)胞浸潤(rùn)和后肢運(yùn)動(dòng)功能的影響。
　　 方法：
　　 1.60只健康成年雌性SD大鼠(200-220克)隨機(jī)分為三組，A組(假手術(shù)組，)僅做T12椎板切除術(shù)，暴露脊髓，并直接縫合切口，其余兩組用改良Allen's打擊法損傷脊髓；B組(對(duì)照治療組)傷后硬膜下注射10μl1％DMSO生理鹽水；C組(BMS-345541治療組)傷后硬

2、膜下注射10μl BMS-345541溶液。用于Westernblot檢測(cè)分析和髓過(guò)氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)活性檢測(cè)的大鼠術(shù)后24h灌注，取標(biāo)本。進(jìn)行運(yùn)動(dòng)功能分析的大鼠術(shù)后飼養(yǎng)至14d，觀察時(shí)間點(diǎn)為：1d，3d，7d,14d。
　　 2．采用BBB評(píng)分方法，觀察大鼠后肢功能恢復(fù)情況。
　　 3．取術(shù)后24h大鼠脊髓用Western blot檢測(cè)分析的方法，觀察各組動(dòng)物脊髓樣本的NF-κB p65

3、及ICAM-1表達(dá)情況，用圖像分析系統(tǒng)計(jì)算各樣本IOD值，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 4．取術(shù)后24h大鼠脊髓，使用紫外可見光分光光度計(jì)檢測(cè)蛋白樣品OD值，根據(jù)公式計(jì)算MPO的活性，進(jìn)而判斷粒細(xì)胞浸潤(rùn)程度，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 5．統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以X±S表示，使用SPSS13.0軟件包進(jìn)行單因素分析，以P＜0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1．同A組比較，B，C兩組脊髓打擊傷后，運(yùn)動(dòng)功

4、能逐漸恢復(fù)，從第7d開始，C組BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分較B組明顯增加，達(dá)到7.42±0.79，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0，05)。
　　 2．通過(guò)Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)A組蛋白樣品中NF-κB p65及ICAM-1均呈低表達(dá)，SCI術(shù)后24h的B組蛋白樣品中NF-κB p65及ICAM-1表達(dá)均明顯升高，而經(jīng)過(guò)治療后C組中的蛋白表達(dá)較B組的明顯減少，通過(guò)各組IOD值計(jì)算，以上差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　

5、 3.根據(jù)檢測(cè)蛋白樣品的OD值，計(jì)算MPO活性，發(fā)現(xiàn)SCI術(shù)后24h的B組的MPO活性明顯較A組和C組的高，而經(jīng)過(guò)BMS-345541治療后的C組的MPO活性雖比A組的高，但較B組的有明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、BMS-345541可促進(jìn)大鼠SCI后肢體運(yùn)動(dòng)功能改善。
　　 2、BMS-345541可抑制大鼠SCI后NF-κB p65過(guò)度活化，進(jìn)而抑制ICAM-1的表達(dá)