溝葉結(jié)縷草組織培養(yǎng)技術(shù)體系的研究.pdf

1、溝葉結(jié)縷草(Zoysia matrella (L.)Merr.),又稱馬尼拉草,具有植株低矮、葉細(xì)色美、草層厚密、覆蓋度好、根系發(fā)達(dá)、分蘗力強(qiáng)、耐踐踏、耐鹽堿等優(yōu)點(diǎn),用它培育的草坪柔軟、嫩綠,既可用作城市綠化的觀賞性草坪,又可用作體育場(chǎng)草坪,是一種比較優(yōu)良的暖季型草坪草.然而溝葉結(jié)縷草也存在生長(zhǎng)緩慢、生長(zhǎng)期短,抗寒性和抗旱性較差等缺點(diǎn),改良其抗性指標(biāo)、擴(kuò)大坪用范圍勢(shì)在必行.組織培養(yǎng)技術(shù)在草坪上的應(yīng)用和研究,除了為繁殖少量的優(yōu)良種質(zhì)外,主

2、要是進(jìn)行遺傳育種探索.該研究建立了溝葉結(jié)縷草的無菌苗體系、進(jìn)行生物工程遺傳改良奠定基礎(chǔ),取得的主要成果如下:1.該實(shí)驗(yàn)就溝葉結(jié)縷草的外植體消毒、取材時(shí)期與方法等問題進(jìn)行了探討,確立了最適的消毒方法,即:首先對(duì)帶芽莖段進(jìn)行預(yù)處理,而后用70﹪酒精表面消毒45s,結(jié)合加有約0.1﹪Tween-80的0.1﹪升汞處理8min,污染率和褐化率較低,分別為7.52﹪和9.73﹪;選擇在初春返青至初夏時(shí)采集外植體材料,無論是在愈傷組織誘導(dǎo)還是腋芽萌

3、動(dòng)上都較容易.2.誘導(dǎo)腋芽增殖的結(jié)果顯示:接種后6-8天,腋芽部位開始逐漸膨大,15-20天左右腋芽萌發(fā),后在節(jié)的部位逐漸形成深綠色的梢叢,30天后梢叢伸長(zhǎng)到1-4cm,腋芽的數(shù)量也增至1-7個(gè)不等,腋芽增殖最適培養(yǎng)基為MS+0.2mg/L IBA+2.0mg/LBA,平均分化芽數(shù)6.57個(gè),平均苗高為4.8cm,差異極顯著.3.溝葉結(jié)縷草無菌苗的最適生根培養(yǎng)基為MS+0.1mg/LNAA+0.3mg/LIBA.將均勻一致的梢叢轉(zhuǎn)到生根

4、培養(yǎng)基上.約10-15天后,陸續(xù)長(zhǎng)出白嫩的細(xì)根,生根率為100﹪,30天后統(tǒng)計(jì)其根長(zhǎng)和數(shù)量,每叢平均根數(shù)為12.5個(gè)左右,不定根的伸長(zhǎng)較快,平均根長(zhǎng)為3.17cm.4.在含有2,4-D的不同培養(yǎng)基上均可誘導(dǎo)出白色絮狀、光滑疏松的愈傷組織,其中MS+2mg/L2,4-D+0.2mg/LKT+200mg/LPro+500mg/LCH對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)最為適宜,誘導(dǎo)率為68.2﹪,16天后才開始出愈傷組織的褐化現(xiàn)象.5.光照條件對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)有