關(guān)節(jié)熏洗儀結(jié)合獨活寄生湯對食蟹猴膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎模型Notch信號通路的影響.pdf

1、目的：膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎(KOA)是人類目前最常見的骨關(guān)節(jié)退行性疾病，熏洗療法在臨床運用中對KOA的治療有著重要作用。但傳統(tǒng)熏洗療法為開放式熏洗，并且溫度不能恒定。通過發(fā)明一種密閉式的關(guān)節(jié)熏洗儀結(jié)合獨活寄生湯加減熏洗干預(yù)食蟹猴KOA模型，對Notch信號通路中相關(guān)分子進行檢測，觀察療效，探討關(guān)節(jié)熏洗儀對食蟹猴KOA模型的治療機制。
　　方法：選取青年雄性食蟹猴28只，隨機選取5只作為正常對照組（Z組），23只食蟹猴采取改良Hulth

2、結(jié)合關(guān)節(jié)劃痕法建立單側(cè)食蟹猴KOA模型。術(shù)后8周通過影像學(xué)對模型做出評價，并隨機選取3只處死進行形態(tài)學(xué)鑒定。剩余食蟹猴隨機分為4組，每組5只，A組為熏洗儀組，采取膝關(guān)節(jié)肢段封閉式熏洗儀熏洗;B組為傳統(tǒng)熏洗組，采用傳統(tǒng)方式熏洗;C組為生理鹽水組，采用生理鹽水熏洗;D組為氨糖美辛組，采用氨糖美辛口服;分別予以熏洗治療及氨糖美辛干預(yù)8周后處死所有食蟹猴，對模型膝關(guān)節(jié)進行組織病理學(xué)觀察，通過RT-qPCR、Western-blot技術(shù)檢測關(guān)節(jié)軟

3、骨中Notch1、COL-Ⅱ在基因與蛋白水平的表達，所有數(shù)據(jù)采取SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件分析。
　　結(jié)果：①所有食蟹猴造模手術(shù)順利，術(shù)后未發(fā)生感染、死亡。②A、B、C、D四組食蟹猴年齡、體重、冠骶長無統(tǒng)計學(xué)差異(F=0.16，P=0.92;F=0.08，P=0.96;F=0.87，P=0.48)，造模過程中手術(shù)時間、術(shù)中失血量無統(tǒng)計學(xué)差異(F=0.96，P=0.43;F=2.58，P=0.09)。③A、B、C、D四組食蟹猴KO

4、A模型膝關(guān)節(jié)X線Kellgren-Lawrence放射學(xué)分級無統(tǒng)計學(xué)差異(H=5.7，P=0.127)。④A、B、C、D四組食蟹猴KOA模型膝關(guān)節(jié)肉眼觀察后Brittberg分級無統(tǒng)計學(xué)差異(H=6.34，P=0.096)。⑤A、B、C、D、Z五組間食蟹猴關(guān)節(jié)軟骨改良Mankin評分差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=208.06，P=0.001)，其中A組改良Mankin評分（5.5±0.71）低于D組（5.8±0.63），差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0

5、.388);其余每兩組間改良Mankin評分均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.001)。⑥膝關(guān)節(jié)肢段封閉式熏洗儀溫度維持效果優(yōu)于傳統(tǒng)熏洗方式。⑦RT-PCR檢測COL-Ⅱ表達A、B、C、D、Z五組有統(tǒng)計學(xué)差異(F=167.05，P=0.001)，其中A組COL-Ⅱ表達高于D組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.342)，其余每兩組間COL-Ⅱ表達具有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.001)。Notch1表達A、B、C、D、Z五組組有統(tǒng)計學(xué)差異(F=35.56，P=

6、0.001)，A組Notch1表達高于D組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.428);其余每兩組間Notch1表達均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.001)。⑧Western-blot檢測COL-Ⅱ表達A、B、C、D、Z五組有統(tǒng)計學(xué)差異(F=167.05，P=0.001)，A組COL-Ⅱ表達高于D組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.075);其余每兩組間COL-Ⅱ表達均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.001)。Notch1表達A、B、C、D、Z五組組有統(tǒng)計學(xué)差異(

7、F=42.51，P=0.001)，其中A組Notch1表達高于D組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.096);其余每兩組間Notch1表達均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.001)。
　　結(jié)論：①通過改良Hulth結(jié)合關(guān)節(jié)劃痕法可在較短時間內(nèi)有效的建立食蟹猴KOA模型。②關(guān)節(jié)熏洗儀溫度恒定性優(yōu)于傳統(tǒng)熏洗方式，同時可以提供一個密閉式的熏洗環(huán)境。③關(guān)節(jié)熏洗儀通過獨活寄生湯熏洗影響Notch信號通路，降低Notch1表達、增加COL-Ⅱ表達，延緩關(guān)節(jié)