慢性乙型肝炎病人外周血中Notch及炎癥性細(xì)胞因子的表達(dá).pdf

1、目的：全世界有3.5億的慢性乙型病毒性肝炎(乙肝)患者，我國(guó)約有1.2億。慢性乙肝是由乙型肝炎病毒(HBV)感染而致病的，屬于炎癥性疾病。發(fā)病時(shí)，機(jī)體內(nèi)骨髓、肝臟、脾臟和淋巴結(jié)中的巨噬細(xì)胞增多，淋巴組織中的B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞增殖分化，這些免疫細(xì)胞釋放細(xì)胞因子和趨化因子，在抗病毒的同時(shí)造成局部長(zhǎng)期的炎癥反應(yīng)，因此炎癥性的免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子在乙型肝炎的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。Notch信號(hào)與細(xì)胞的命運(yùn)決定和免疫系統(tǒng)的發(fā)育有密切關(guān)

2、系。最近大量的研究表明：在對(duì)病毒等病原微生物的應(yīng)答過(guò)程中，Notch信號(hào)對(duì)巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、T和B淋巴細(xì)胞等外周免疫細(xì)胞的激活和分化方向起著關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用。本研究旨在考察Notch信號(hào)分子及一些細(xì)胞因子和趨化因子在慢性乙型肝炎患者外周血中的表達(dá)情況。
　　方法：⑴收集2010年11月-2012年1月之間在河北省衡水市哈勵(lì)遜國(guó)際和平醫(yī)院、衡水市傳染病醫(yī)院就診的慢性乙型肝炎患者30例，根據(jù)轉(zhuǎn)氨酶的高低，將實(shí)驗(yàn)組分為轉(zhuǎn)氨酶大于100

3、U/ml組和轉(zhuǎn)氨酶40-100U/ml組，另外收集健康人30例為正常對(duì)照組。⑵采集兩組實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組的新鮮空腹抗凝血，分離單個(gè)核細(xì)胞，提取RNA，反轉(zhuǎn)錄為cDNA，應(yīng)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)Notch1、Notch2、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL-10、IL-17、IL-17F、Hes-1、RANTES、DIL-4、MIP-3和Jagged-1。收集實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組的血清，應(yīng)用放免的方法測(cè)定IL-4，IL-6和I

4、L-8。
　　結(jié)果：①Notch1、Notch.2、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL-10、IL-17、IL-17F、Hes-1、RANTES、DIL-4、Jagged-1、IL-4、IL-6和IL-8兩組實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組相比較，測(cè)定水平均明顯升高，具有顯著性差異，P<0.05。其中，轉(zhuǎn)氨酶大于100U/ml的實(shí)驗(yàn)組中的各分子表達(dá)水平升高更明顯，其中IL-10的表達(dá)量為正常對(duì)照組的13269倍，Notch1、IL-17F

5、和RANTES三項(xiàng)的表達(dá)水平分別為正常對(duì)照組的3121倍、1394倍和1065倍。兩組實(shí)驗(yàn)組相比較，轉(zhuǎn)氨酶大于100U/ml組比轉(zhuǎn)氨酶40-100U/ml組各指標(biāo)的測(cè)定水平明顯升高，具有顯著性差異(P<0.05)。轉(zhuǎn)氨酶大于100U/ml組Jagged-1的mRNA的表達(dá)量為轉(zhuǎn)氨酶40-100U/ml組的16.24倍，差異最大。②兩組實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組相比較，測(cè)定水平?jīng)]有顯著性差異，P>0.05。兩組實(shí)驗(yàn)組相比較，測(cè)定水平?jīng)]有顯著性差異

6、，P>0.05。
　　結(jié)論：慢性乙肝患者的Notch1和Notch2兩種受體，DIL-4和Jagged-1兩種配體，Notch靶基因Hes-1，Th1型細(xì)胞因子IFN-γ，Th2型細(xì)胞因子IL4和IL-10，Th17型細(xì)胞因子IL-17和IL-17F，抗病毒的細(xì)胞因子IFN-α和IFN-β，趨化因子RANTES以及促炎癥細(xì)胞因子IL-6均比健康人顯著升高。并且轉(zhuǎn)氨酶越高，表達(dá)水平越高.這些結(jié)果提示：Notch信號(hào)可能在乙肝的發(fā)展過(guò)