AC3敲除小鼠MOE發(fā)育的部分表觀遺傳因子分析.pdf

1、腺苷酸環(huán)化酶3（AC3）在小鼠嗅覺感應(yīng)的過程中有重要作用。敲除AC3小鼠表現(xiàn)為肥胖，嗅覺喪失，學(xué)習(xí)及記憶能力下降，主要嗅覺表皮組織（MOE）隨著小鼠生長發(fā)育表現(xiàn)為MOE變薄，組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)松散，樹突發(fā)育受損等現(xiàn)象。利用基因芯片對(duì)AC3敲除小鼠MOE分析發(fā)現(xiàn)，AC3缺失小鼠MOE基因表達(dá)發(fā)生顯著變化，包括許多表觀遺傳相關(guān)因子表達(dá)發(fā)生改變，例如Tet3，BAF53b等。表觀遺傳對(duì)細(xì)胞發(fā)育過程具有重要的調(diào)控作用，研究發(fā)現(xiàn)Tet3過表達(dá)影響嗅覺神

2、經(jīng)元OR基因的表達(dá)，BAF53b對(duì)神經(jīng)元刺激誘導(dǎo)的樹突發(fā)育有重要作用，那么 AC3敲除后Tet3與 BAF53b在蛋白水平的變化如何？Tet3是Tet蛋白家族在MOE中表達(dá)量最高的，Tet蛋白能夠催化5mC氧化為5hmC，5hmC在神經(jīng)元中含量豐富并對(duì)基因調(diào)控和細(xì)胞特性有重要作用，AC3敲除對(duì)5mC和5hmC有什么影響？H3K27me3在神經(jīng)分化過程中有重要作用，Tet3的表達(dá)伴隨其啟動(dòng)子區(qū)域H3K27me3水平下降，AC3缺失是否影響

3、 H3K27me3表達(dá)？隨著小鼠 MOE發(fā)育，5mC，5hmC，Tet3，H3K27me3和 BAF53b的表達(dá)水平有什么變化？這些問題目前尚未得到解決。
　　本文利用免疫熒光染色技術(shù)，以AC3敲除（AC3-/-）和野生型（AC3+/+）小鼠為材料，選取7天，30天及90天不同發(fā)育階段，對(duì)DNA修飾5mC/5hmC，DNA修飾調(diào)控因子TET3，組蛋白賴氨酸修飾H3K27me3，組蛋白結(jié)構(gòu)調(diào)節(jié)因子BAF53b進(jìn)行染色。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，AC

4、3敲除后，同年齡小鼠 MOE內(nèi)5mC表達(dá)量變化不大，但 Tet3表達(dá)量發(fā)生上調(diào)，5hmC發(fā)生下調(diào)。H3K27me3與 BAF53b表達(dá)量在發(fā)生下調(diào)。隨著年齡的增長，5hmC、BAF53b和 Tet3的表達(dá)量表現(xiàn)為下調(diào)，H3K27me3表達(dá)量表現(xiàn)為上調(diào)，5mC表達(dá)量變化不大。結(jié)果表明，AC3缺失后，不僅引起了部分表觀遺傳因子發(fā)生差異表達(dá)，而且引起了一些表觀遺傳標(biāo)記在染色體中的水平發(fā)生變化。我們推測(cè)，AC3敲除后導(dǎo)致cAMP信號(hào)通路受阻，非