早衰小鼠P1型(SAMP1)胚胎干細胞的建系研究.pdf

1、自1981年小鼠胚胎干細胞成功建系以來,人們對胚胎干細胞的研究不斷深入：⑴胚胎干細胞已成為研究細胞分化、器官發(fā)生以及了解胚胎發(fā)育機制的有效手段；⑵對胚胎干細胞進行基因操作有助于確定特定基因在發(fā)育、生理和病理過程中的作用；⑶成功建系人類疾病動物模型的胚胎干細胞,結合近年來興起的基因打靶(基因敲除或基因敲入)等生物技術,可以研究人類高血壓、早衰等多種自發(fā)性疾病的發(fā)生機制,并對其治療和預防提供科學依據(jù)。胚胎干細胞建系是進行所有這些研究的前提和

2、基礎。雖然胚胎干細胞建系技術已經獲得了不斷的豐富和完善,但是二十多年以來能夠進行生殖系傳代明確建系的種屬仍然僅限于小鼠有限的幾種品系,LIF加飼養(yǎng)層的有血清培養(yǎng)體系并不能通用于所有的小鼠及其他物種的胚胎干細胞建系工作。2008年華人科學家應其龍博士領頭的研究小組基于“胚胎干細胞自我更新基態(tài)”理論利用2i小分子培養(yǎng)體系成功建立大鼠胚胎干細胞系為更多的小鼠品系甚至其它物種的胚胎干細胞建系工作帶來了全新的理論與技術支持。
　　 本文以

3、醫(yī)學研究熱點之一的老年性疾病的動物實驗模型早衰小鼠P1型即SAMPl小鼠作為研究對象,旨在通過應用新型的添加小分子的無血清2i新型培養(yǎng)體系對分離的SAMP1小鼠囊胚的內細胞團(ICM)進行培養(yǎng)而獲得胚胎干細胞,成功建立SAMP1小鼠疾病動物模型的胚胎干細胞系。建立該疾病模型SAMPl小鼠胚胎干細胞系具有重大意義：①目前國內外從未有過早衰小鼠模型胚胎干細胞成功建系的報道,應用2i小分子培養(yǎng)體系建系成功很好的驗證了這種培養(yǎng)體系的通用型；②對

4、這種疾病模型小鼠胚胎干細胞的研究有助于人們清楚了解早衰的遺傳學特征,從而確定疾病相關基因,并實施基岡打靶等基因矯正技術,根據(jù)過早衰老、老年性耳聾等相關疾病的發(fā)生機理有的放矢,對癥下藥,為這類疾病最終的治療和攻克奠定基礎。
　　 本實驗通過分離SAMP1小鼠囊胚內細胞團(ICM)、對其進行培養(yǎng)并對獲得的胚胎干細胞進病毒感染,得出：⑴3.5d SAMP1小鼠囊胚可以在2i培養(yǎng)條件下自然孵化出內細胞團(ICM),進一步培養(yǎng)可獲得類胚胎