IL-33增強(qiáng)免疫抑制小鼠抗感染能力及其機(jī)制的初步探討.pdf

1、環(huán)磷酰胺作為最常用的抗腫瘤化療藥之一，具有較強(qiáng)的免疫抑制作用，主要表現(xiàn)為外周血白細(xì)胞急劇減少。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）主要引發(fā)化膿性感染，其傳播速度快，具有多重耐藥性，致病性和病死率高。中性粒細(xì)胞由骨髓中造血干細(xì)胞分化而來，當(dāng)病原微生物突破機(jī)體的物理屏障進(jìn)入組織，中性粒細(xì)胞迅速趨化至感染部位，吞噬殺傷病原微生物。作為“警報(bào)素”和前炎性細(xì)胞因子，IL-33在細(xì)胞凋亡、分化以及多種免疫性疾病中發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。本課題通過建立小鼠

2、免疫抑制模型，觀察IL-33在免疫功能抑制機(jī)體中的抗感染作用及其機(jī)制，為臨床上免疫功能低下患者的治療提供新思路。
　　研究目的：
　　觀察IL-33在免疫功能抑制機(jī)體中的抗感染作用，并結(jié)合體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，探討IL-33對(duì)造血干細(xì)胞定向分化為中性粒細(xì)胞的影響，及IL-33對(duì)中性粒細(xì)胞殺菌、凋亡等生物學(xué)功能的調(diào)節(jié)機(jī)制。
　　研究方法：
　　使用環(huán)磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型，腹腔注射IL-33后感染MRSA，觀察小鼠存活

3、率、體內(nèi)中性粒細(xì)胞數(shù)目以及細(xì)菌數(shù)目的變化，初步評(píng)價(jià)IL-33的療效；用percoll分離中性粒細(xì)胞，從細(xì)胞水平探討IL-33對(duì)中性粒細(xì)胞趨化、吞噬、殺傷功能的影響；用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)IL-33對(duì)中性粒細(xì)胞STAT3磷酸化、ROS生成及其凋亡的影響；免疫磁珠分選造血干細(xì)胞，使用細(xì)胞增殖標(biāo)記物BrdU檢測(cè)IL-33對(duì)細(xì)胞增殖的作用，集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè) IL-33對(duì)造血干細(xì)胞分化的影響；IL-33預(yù)處理的中性粒細(xì)胞采用粒細(xì)胞輸注法對(duì)免疫抑制小鼠進(jìn)

4、行治療，探討其抗感染作用。
　　研究結(jié)果：
　　1、IL-33增強(qiáng)免疫抑制小鼠的抗感染能力
　　成功建立小鼠免疫抑制模型，IL-33治療后，免疫抑制小鼠在MRSA感染時(shí)存活率明顯提高，細(xì)菌負(fù)荷量降低，外周血中性粒細(xì)胞數(shù)目增多。免疫抑制小鼠中性粒細(xì)胞趨化、吞噬、殺傷功能均被抑制，而IL-33可提高中性粒細(xì)胞生物學(xué)功能。
　　2、IL-33通過促進(jìn)造血干細(xì)胞分化為中性粒細(xì)胞
　　IL-33活化造血干細(xì)胞中JAK

5、2-STAT3信號(hào)通路，同時(shí)也激活STAT3下游的C/EBPβ-c-myc，IL-33通過JAK2-STAT3-C/EBPβ-c-myc促進(jìn)造血干細(xì)胞增殖及定向分化為中性粒細(xì)胞。
　　3、IL-33增強(qiáng)中性粒細(xì)胞的功能
　　IL-33通過JAK2-STAT3信號(hào)調(diào)控中性粒細(xì)胞ROS的生成從而增強(qiáng)其殺菌功能，同時(shí)也通過JAK2-STAT3通路，上調(diào)Bcl-2表達(dá)，下調(diào)Bax表達(dá)，從而抑制中性粒細(xì)胞的凋亡。
　　4、輸注I