雞精液低溫保存技術(shù)和精子抗凍性研究.pdf

1、隨著雞人工授精技術(shù)的廣泛應(yīng)用，對(duì)精液品質(zhì)及其保存效果的要求也越來(lái)越高。適當(dāng)?shù)南♂尯偷蜏乇４媸浅浞掷脙?yōu)良種公雞和實(shí)現(xiàn)短期異地輸精的關(guān)鍵技術(shù)。精液冷凍保存對(duì)珍稀資源的保存和利用具有重要意義，而精子抗凍性差異可能是影響冷凍保存技術(shù)的根本原因。因此，本論文對(duì)雞精液稀釋和低溫保存方案進(jìn)行優(yōu)化，并對(duì)雞精子抗凍性差異開展研究，主要內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　1.研究了稀釋和低溫保存對(duì)雞精液品質(zhì)和精子受精能力的影響。將精液分為4組，A組對(duì)照;B組用B

2、PSE稀釋液按照1∶1比例稀釋;C組精液離心后去除精漿，加入與精漿等體積的BPSE稀釋液重新混勻;D組在C組處理的基礎(chǔ)上用BPSE稀釋液按照1∶1比例再稀釋。將每組精液分為兩份，一份用于直接輸精和精液品質(zhì)測(cè)定，另一份在4℃保存，每8h檢測(cè)一次精液品質(zhì)，將保存24 h后的精液用于人工輸精，統(tǒng)計(jì)受精率和孵化指標(biāo)。結(jié)果顯示，未經(jīng)低溫保存的A、B組精子活力、活率、受精率和孵化率無(wú)顯著差異(P＞0.05)，C、D兩組較A、B兩組的精子活力極顯著降

3、低(P＜0.01);B、C兩組受精率、孵化率和A組無(wú)顯著差異，D組極顯著低于A組(P＜0.01);隨著低溫保存時(shí)間的延長(zhǎng)，A組精子活力和活率均極顯著降低（P＜0.01），畸形率顯著增加(P＜0.05)，保存24 h后A、B組精子活力均顯著低于C、D組(P＜0.05)，A、B和C組的受精率和入孵蛋的孵化率均顯著降低(P＜0.01)，D組受精率和入孵蛋孵化率差異不顯著（P＞0.05）。結(jié)果表明，北京油雞新鮮精液可以進(jìn)行1∶1稀釋，不影響受精

4、率，提高公雞的配種能力;將新鮮精液離心去除精漿后再稀釋，在4℃保存24 h后，精子活力的下降幅度小，可維持正常受精能力，可用于異地輸精。
　　2.研究了北京油雞精子抗凍性的差異，并對(duì)主要精液品質(zhì)、精漿生化指標(biāo)和候選基因(HSP70、HSP90、TEKT4、TEKT5、CIRBP和RKCA)在睪丸中的表達(dá)量進(jìn)行了相關(guān)性分析。新鮮精液經(jīng)過(guò)DMA細(xì)管冷凍法冷凍保存和復(fù)融，根據(jù)精子復(fù)活率（復(fù)融后活力/冷凍前活力）分為高、低復(fù)活率組，比較冷

5、凍前精子密度、活力、精漿中果糖濃度、MDA濃度和精漿SOD活性。結(jié)果顯示，精子密度、活力，精漿MDA濃度和精漿SOD活性在高、低精子復(fù)活率組均不存在顯著差異（P＞0.05），但精漿果糖含量在低復(fù)活率組顯著高于高復(fù)活率組（P＜0.01）。精子復(fù)活率與HSP90的表達(dá)存在正相關(guān)趨勢(shì)(P=0.08，r=0.36)，與CIRBP的表達(dá)存在顯著負(fù)相關(guān)(P＜0.05，r=-0.45)，與HSP70、TEKT4、TEKT5和PRKCA的表達(dá)不存在顯著