姜黃素對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)、非特異性免疫及抗氧化蛋白基因(Prx)表達(dá)的影響.pdf

1、本研究針對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖中細(xì)菌性疾病爆發(fā)導(dǎo)致的抗生素濫用現(xiàn)象及養(yǎng)殖動(dòng)物感染疾病引起的氧化應(yīng)激問(wèn)題，以團(tuán)頭魴(Megalobrama amblycephala)幼魚(yú)為研究對(duì)象，探明抗氧化蛋白基因(Peroxiredoxin，Prx)在其肝臟、腎臟、脾臟、心臟、腦、鰓、肌肉、鰾、前腸及后腸10個(gè)組織器官中的表達(dá)分布情況，并采用姜黃素投喂動(dòng)物的手段，探求姜黃素在團(tuán)頭魴幼魚(yú)飼料中的適宜添加量以及適宜的投喂模式。并進(jìn)一步解析嗜水氣單胞菌對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)抗氧

2、化蛋白基因在組織器官中的表達(dá)分布的影響及在姜黃素不同添加量及投喂模式下團(tuán)頭魴生理、免疫反應(yīng)及肝臟抗氧化蛋白表達(dá)差異的影響。主要結(jié)果如下:
　　1、研究抗氧化蛋白基因Peroxiredoxin在團(tuán)頭魴肝臟、腎臟、脾臟、心臟、腦、鰓、肌肉、鰾、前腸及后腸10個(gè)組織器官中的表達(dá)分布影響，表明了PrxⅠ、PrxⅡ、PrxⅢ、PrxⅣ、 PrxⅤ、PrxⅥ mRNA在團(tuán)頭魴10個(gè)主要組織中均有表達(dá):PrxⅠ:心臟、腎臟＞肝臟、脾臟、鰓＞后腸

3、＞前腸＞腦、肌肉、鰾;PrxⅡ:肝臟＞前腸＞后腸＞心臟、腦、鰾、腎臟、脾臟、鰓、肌肉;PrxⅢ:肌肉、鰾＞脾臟＞肝臟＞心臟＞前腸、后腸＞鰓、腦、腎臟;PrxⅣ:肝臟＞后腸＞前腸＞心臟、腦、肌肉＞腎臟＞脾臟、鰓、鰾;PrxⅤ:腦、心臟＞肌肉＞后腸＞前腸＞腎臟、脾臟、鰓、肝臟、鰾;PrxⅥ:肝臟＞前腸＞肌肉＞后腸＞腎臟＞脾臟、心臟＞鰓＞鰾、腦?？寡趸鞍谆蛟诟鹘M織上的表達(dá)水平的差異性，說(shuō)明其表達(dá)具有特異性。在嗜水氣單胞菌感染24 h后，抗

4、氧化蛋白基因PrxⅠ、PrxⅡ、PrxⅢ、 PrxⅣ、 PrxⅤ、PrxⅥmRNA在團(tuán)頭魴10個(gè)組織器官中的表達(dá)較感染前出現(xiàn)不同程度的升高，且在肝臟中的表達(dá)水平普遍偏高。鑒于抗氧化蛋白基因在嗜水氣單胞菌感染前后，在肝臟中的表達(dá)水平均較高推斷肝臟在團(tuán)頭魴抗氧化過(guò)程中發(fā)揮重要作用。
　　2、研究姜黃素對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)生長(zhǎng)性能及非特異性免疫的影響，配制姜黃素水平為0、15、30、60、120、240 mg/kg的6組等氮等能的試驗(yàn)飼料，每組

5、3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25尾魚(yú)(初均重:3.15±0.022 g)，試驗(yàn)周期為60天。
　　結(jié)果表明:
　　(1)與對(duì)照組相比，60 mg/kg姜黃素添加組的增重率(WGR)和特定生長(zhǎng)率(SGR)顯著升高(p＜0.05)，餌料系數(shù)顯著下降(p＜0.05），各組間臟體比(VSI)無(wú)顯著性差異(p＞0.05）;
　　(2)白細(xì)胞(WBC)數(shù)隨姜黃素添加量的增加呈先升高后降低的趨勢(shì)，且60 mg/kg姜黃素添加組的白細(xì)胞(WBC

6、)數(shù)顯著高于對(duì)照組(p＜0.05）;
　　(3)與對(duì)照組相比，60、120 mg/kg姜黃素添加組的TNF-α、ACH50活力顯著升高(p＜0.05);60 mg/kg姜黃素添加組的IL-1β活力最高，且顯著高于15、30、120 mg/kg姜黃素添加組以及對(duì)照組(p＜0.05);
　　(4)60 mg/kg姜黃素添加組，攻毒后96 h的累積死亡率顯著低于對(duì)照組(p＜0.05);
　　(5) PrxⅠ、PrxⅡ、Prx

7、Ⅳ、 PrxⅤ、PrxⅥ mRNA表達(dá)水平在姜黃素添加量為60 mg/kg時(shí)達(dá)最大，且與對(duì)照組差異顯著(p＜0.05)。綜上所述，在飼料中添加適量的姜黃素(60 mg/kg)可提高團(tuán)頭魴幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能、非特異性免疫反應(yīng)及抗氧化能力。
　　3、研究日糧姜黃素不同投喂模式對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)生長(zhǎng)及非特異性免疫的影響，分別以5種投喂模式(P1連續(xù)喂養(yǎng)基礎(chǔ)日糧，即對(duì)照組;P2、P3、P4、先投喂添加60mg/kg姜黃素的試驗(yàn)日糧，再投喂基礎(chǔ)日糧，

8、P2每周一交替，P3每?jī)芍芤唤惶?，P4每四周一交替，P5連續(xù)投喂添加60 mg/kg姜黃素的試驗(yàn)日糧）飼養(yǎng)8周初均重為3.15±0.01 g的團(tuán)頭魴幼魚(yú)，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25尾魚(yú)。
　　結(jié)果顯示:
　　(1) P3組魚(yú)的增重率(WGR)及特定生長(zhǎng)率(SGR)相比于對(duì)照組及P5組顯著升高(p＜0.05），且餌料系數(shù)(FCR)達(dá)最低并與P1、P2、P5組差異顯著(p＜0.05）;
　　(2)相比于對(duì)照組，P2、P3、

9、P4組呼吸爆發(fā)活性和白細(xì)胞介素（IL-1β）活性均顯著升高(p＜0.05);
　　(3)血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性根據(jù)投喂模式的不同呈先下降后上升趨勢(shì)，且在P3模式下的活力顯著低于對(duì)照組(p＜0.05)，而抗腫瘤壞死因子(TNF-α)活性及補(bǔ)體替代途徑活力(ACH50)呈相反趨勢(shì)，且在P3模式下顯著高于對(duì)照組(p＜0.05）;
　　(4)P3組攻毒后96 h的累積死亡率顯著低于P1組(p＜0.05）;

10、
　　(5) P3組較P1組顯著提高了PrxⅠ、PrxⅡ、PrxⅢ、 PrxⅣ、PrxⅤ、PrxⅥ mRNA表達(dá)水平(p＜0.05)，且達(dá)最大。因此，本試驗(yàn)建議以先投喂添加60 mg/kg姜黃素的試驗(yàn)日糧，再投喂基礎(chǔ)日糧，每?jī)芍芤唤惶娴耐段鼓Ｊ斤曫B(yǎng)團(tuán)頭魴幼魚(yú)。
　　4、研究了姜黃素不同添加量及投喂模式對(duì)嗜水氣單胞菌感染下團(tuán)頭魴生理、免疫反應(yīng)及肝臟抗氧化蛋白表達(dá)差異的影響。
　　結(jié)果顯示，團(tuán)頭魴在嗜水氣單胞菌感染24 h

11、后:
　　1、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性均較感染前有所升高，相比與對(duì)照組，60 mg/kg姜黃素添加組及P3組投喂模式下團(tuán)頭魴AST活性顯著降低(p＜0.05);
　　2、白細(xì)胞數(shù)量、NO含量、NOS、IL-1β及TNF-α活性在姜黃素添加量為60 mg/kg及P3組投喂模式時(shí)最高且與對(duì)照組差異顯著(p＜0.05）;
　　3、各組抗氧化蛋白基因表達(dá)水平均較感染前有所升高，說(shuō)明嗜水氣單胞菌有上調(diào)抗氧化