綿羊Myostatin基因cDNA全序列的克隆及在CHO中的表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、石河子大學碩士學位論文綿羊Myostatin基因cDNA全序列的克隆及在CHO中的表達姓名：劉蓉芳申請學位級別：碩士專業(yè)：動物遺傳育種與繁殖指導教師：王金富劉明軍20070601綿羊Myostatin基因eDNA全序列的克隆及在CHO細胞中的表達eDNASequenceofMyostatinGeneofSheepCloningandExpressioninCHOStudent：RongFangLiu(MolecularInheritan

2、ceandAnimalBreeding)DissertationSupervisor：ProfJinFuWang，ResearcherMingJunLiuAbstractMyostatin(MST砷istransforminggrowthfactorbeta(TGF—p)superfamilymemberofthemaiNyinanimalmuscletissue，suchasmusclegrowthregulationplaysane

3、gativeroleWiththesamefamilyofGDF一8andIGF，theMSTNgenemutationorpartlydeletioncarlleadtothecompletelossofinhibitoryfunction，thuscausemusclecellproliferationandtheincreaseofmusclefibersMSTNgenenormallythreeexonsmadtwointron

4、s，whichCanexpressionindifferenttissues，Butabundancesareobviousdifferences，musclehi曲estexpression，andotherorganizationshaveexpressedThecedingsequenceofSheepMSTNgeneincluding1128bpencoding375aminoacids。Manystudieshaveshown

5、thattheMSTNgeneiSaffectedanimalmusclegrowthintheimportantcandidategeneAnimalbreedinghasbecomethemajorchooseoneoftheobjectivesoftraits，Screeningandidentificationoftheimpactofthegrowthraterelatedgenesorqualitytraitloci(QTL

6、)andimprovemeatqualityincreaseleanmeatrate，haveimportanttheoreticalsignificanceandvalueMSTNgeneofsheepcloningandexpressionforgenetargetingandmUScledevelopmenteontr01mechanismmadethefound撕onInthisexperimentCodetta@)andDor

7、per(子)sheepbreedinghybridmuscletotalRNAasatemplate，eDNAwassynthesizedbyreversetranscriptionAccordingtotheknownsheepMSTNeDNAsequence，designedfivespecificprimersusednestedPCR，MSTNgenewasamplifiedMSTNgenecloninginpMD20一Tvec

8、tortoformtherecombinantplasmidMSTNpMD20TTherecombinantplasmidwastransformedintoEsehefichiacoliEuropium，usingbluewhite，screenedpositiveclonesBamHIandXhoIdigestedMSTNpMD20一TandeukaryoticexpressionvectorpcDNA31，itwillfragme

9、ntwasclonedintothevectorpcDNA3IbeenMSTNpcDNA3，1TherecombinantplasmidwastransformedintoEscherichiacoliEuropium，wasselectedbycloning，PCRamplificationandsequencinganalysisMyostatingeneexpressionusingliposomemediated，TheMSTN

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