高壓氧調(diào)控急性重癥胰腺炎大鼠脾細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討高壓氧治療對(duì)急性重癥胰腺炎大鼠脾細(xì)胞凋亡的影響，研究其發(fā)生機(jī)制，并為合理開展相關(guān)臨床治療提供理論依據(jù)。
　　方法:首先選取45只SD雄性大鼠，隨機(jī)分為3組，即正常對(duì)照組（5只）、假手術(shù)（sham）組（20只）、急性重癥胰腺炎（SAP）組（20只），其中sham組只進(jìn)行單純的開關(guān)腹術(shù)，SAP組均采用逆行膽胰管注射?；悄懰徕c的方法制備胰腺炎模型，sham組和SAP組各分為4個(gè)亞組，每組5只，分別在術(shù)后3h、6h、12h和24

2、h處死。檢測(cè)正常對(duì)照組和各模型組大鼠血淀粉酶，并用Western blot方法檢測(cè)所提取的各組脾組織蛋白中Bax和Bcl-2的表達(dá)量，Bax在急性重癥胰腺炎各亞組中表達(dá)以6h組最高，之后降低；Bcl-2表達(dá)呈遞減趨勢(shì)，故選取SAP-6h組為HBO干預(yù)組；再選取30只SD雄性大鼠，隨機(jī)分為急性重癥胰腺炎高壓氧治療（SAP-HBO）組（15只）和急性重癥胰腺炎6h（SAP-6h）組（15只），其中SAP-HBO組于造模成功后1h內(nèi)給予高壓氧

3、治療（壓力為2ATA，氧濃度98％，治療時(shí)間為1h），分別于造模后6h處死SAP-HBO組和SAP-6h組。計(jì)算各組大鼠腹水量；HE染色觀察胰腺組織病理變化；Western blot方法檢測(cè)所提取的各組脾組織蛋白中Bax和Bcl-2的表達(dá)量；采用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的標(biāo)記染色法（TUNEL法）檢測(cè)脾臟細(xì)胞的凋亡，計(jì)算凋亡指數(shù)（AI）。
　　結(jié)果:
　　1.SAP-HBO組Bax表達(dá)明顯低于SAP-6h組；SAP-HBO組

4、Bcl-2表達(dá)明顯高于SAP-6h組；
　　2.SAP-HBO組凋亡指數(shù)（30.072±1.143）明顯低于SAP-6h組（58.440±1.263）；
　　3.SAP-6h組胰腺組織標(biāo)本可見明顯出血壞死，大量炎細(xì)胞浸潤，而SAP-HBO組胰腺組織標(biāo)本出血壞死及炎細(xì)胞浸潤情況輕于SAP-6h組；
　　4.SAP-HBO組腹水量（6.200±0.960ml）明顯低于SAP-6h組（11.033±1.187ml）。