1、螺旋藻被譽(yù)為“21世紀(jì)最理想的食品”。隨著保健品的生產(chǎn)和開發(fā),螺旋藻的安全品質(zhì)越來越受到人們的關(guān)注。近年來,我國部分品牌的螺旋藻保健品中發(fā)生了砷(As)含量超標(biāo)事件,開展螺旋藻砷污染控制的研究已非常緊迫。以往這方面的研究大多集中在藻粉中總As含量的檢測和螺旋藻As污染源的分析。有關(guān)磷(P)濃度如何影響螺旋藻吸附、吸收和轉(zhuǎn)化砷酸鹽As(Ⅴ)、亞砷酸鹽As(Ⅲ)的研究仍鮮有報道。本試驗以鈍頂螺旋藻為研究對象,首先用不同濃度As(Ⅴ)、As(
2、Ⅲ)處理螺旋藻7d,研究藻體對As的吸附和吸收特性;然后降低培養(yǎng)液中P濃度,研究不同P濃度對螺旋藻生長的影響;在藻體生長不受影響的情況下,研究不同P濃度對螺旋藻As(Ⅴ)、As(Ⅲ)吸附、吸收及胞內(nèi)As形態(tài)的影響。主要研究結(jié)果如下:
1.不同P濃度對螺旋藻生長的影響
采用實驗室內(nèi)培養(yǎng),設(shè)置系列P濃度(1/200P正~P正,P正為正常P供應(yīng)時培養(yǎng)基中P的濃度88.9 mg· L-1)處理,研究不同P濃度對螺旋藻生物量、
3、藻膽蛋白、葉綠素含量的影響。結(jié)果表明,與P正相比,1/10、1/25、1/50P正對螺旋藻的生長沒有影響;當(dāng)P濃度降低時1/100P正時,藻體藻膽蛋白顯著降低,葉綠素含量增加;當(dāng)P繼續(xù)降低至1/200P正時,螺旋藻的生物量、藻膽蛋白、葉綠素含量降低,生長受到顯著影響。
2.不同濃度As(Ⅴ)、As(Ⅲ)對螺旋藻生長、As富集的影響
分別用不同濃度As(Ⅴ)(50、100、150、200、250、300μg·L-1)、
4、As(Ⅲ)(50、100、200、300μg·L-1)處理螺旋藻,比較不同As處理對螺旋藻生長和As吸附、吸收特性的影響。研究結(jié)果表明,與無As處理的對照組相比,不同濃度As(Ⅴ)對螺旋藻的生物量幾乎無影響,As(Ⅲ)處理的藻體生物量有增加的趨勢,但變化不顯著。螺旋藻As吸附量、吸收量和總砷含量均隨著培養(yǎng)液中As處理濃度的升高顯著增加。在相同As處理濃度下,As(Ⅲ)處理的藻體As吸收量和總砷含量均比As(Ⅴ)處理的藻體高,而As吸附量
5、相差不大。50、100μg·L-1 As(Ⅴ)處理的螺旋藻幾乎不吸收As,As(Ⅲ)處理的藻體As吸收量分別為0.242、0.300 mg·kg-1。因此,在相同As濃度處理時,螺旋藻對As(Ⅲ)的富集能力更強(qiáng)。此外,當(dāng)培養(yǎng)液中As(Ⅴ)濃度達(dá)到150μg·L-1時,藻體富集的As含量為1.006 mg·kg-1,超過了我國保健品中As的限量值1.0 mg·kg-1。As(Ⅲ)處理濃度為200μg·L-1、300μg·L-1,藻體總砷含
6、量為1.471 mg·kg-1、2.285 mg·kg-1,嚴(yán)重超過標(biāo)準(zhǔn)限量。但大部分的As被吸附在細(xì)胞表面,因此可以通過PBS洗脫明顯降低藻體的總砷含量。此外,As(Ⅴ)處理時螺旋藻胞內(nèi)只有As(Ⅴ)一種As形態(tài),而As(Ⅲ)處理的藻體胞內(nèi)同時存在As(Ⅲ)和As(Ⅴ),但以后者為主要形態(tài)。
3.不同P濃度對螺旋藻吸附、吸收和轉(zhuǎn)化As(Ⅴ)、As(Ⅲ)的影響
設(shè)置在不影響螺旋藻正常生長的P濃度(1/50P正~P正)
7、,分別用As(Ⅴ)(300μg·L-1)、As(Ⅲ)(200、300μg·L-1)處理螺旋藻,研究比較不同P濃度對螺旋藻As(Ⅴ)、As(Ⅲ)吸附、吸收和胞內(nèi)As形態(tài)的差異。研究結(jié)果表明,正常P條件下,300μg·L-1 As(Ⅴ)、As(Ⅲ)處理的藻體吸收As含量分別為0.202、0.802 mg·kg-1;當(dāng)P濃度為1/25 P正時,藻體As吸收量分別顯著增加至1.369、2.181 mg·kg-1;P降低至1/50P正藻體吸收的A
8、s含量繼續(xù)增加至1.457、2.672 mg·kg-1,表明降低培養(yǎng)液中P的濃度會促進(jìn)藻體對As的吸收,增加了螺旋藻As污染超標(biāo)的風(fēng)險。此外,用As(Ⅴ)處理螺旋藻后,培養(yǎng)液中P濃度的降低還會促進(jìn)螺旋藻胞內(nèi)As的還原、甲基化和外排過程。當(dāng)用As(Ⅲ)處理時,螺旋藻對As(Ⅲ)具有較強(qiáng)的氧化作用,降低培養(yǎng)液P濃度也促進(jìn)了上述過程的發(fā)生。在300μg·L-1As(Ⅴ)處理下,僅當(dāng)P濃度降低至1/50P正時,螺旋藻胞內(nèi)產(chǎn)生二甲基砷(DMA)。