煙草野火和角斑病菌鑒定方法研究.pdf

1、0分類號Q33學(xué)校代碼10233密級公開學(xué)號10233137128碩士研究生學(xué)位論文題目:煙草野火和角斑病菌鑒定方法研究學(xué)科門類:理學(xué)一級學(xué)科:生物學(xué)二級學(xué)科:遺傳學(xué)研究方向:分子生物學(xué)研究生:張萌指導(dǎo)教師:郭兆奎研究員答辯日期:2016年6月5日中文摘要I中文摘要煙草野火病(Pseudomonassyringaepv.tabaci)和角斑病（Pseudomonassyringaepv.angulata）是侵染煙草的兩種主要細(xì)菌性病害。

2、為了指導(dǎo)煙農(nóng)快速、準(zhǔn)確識別和有效的病害防治對煙草野火和角斑病進(jìn)行了鑒定方法研究。1.煙草野火病、角斑病分子鑒定方法的建立根據(jù)NCBI的煙草野火和角斑病菌相關(guān)基因序列設(shè)計(jì)引物，經(jīng)PCR產(chǎn)物測序序列對比找到病原菌差異序列，再設(shè)計(jì)PCR鑒定引物，篩選獲得野火病和角斑病菌特異性PCR鑒定引物各1對，建立了煙草野火病和角斑病的分子鑒定方法。2.煙草野火病、角斑病分子鑒定方法的驗(yàn)證利用特異PCR引物對采集分離的16個(gè)疑似野火病菌和16個(gè)疑似角斑病菌

3、以及番茄田表土和池塘水分離微生物、大豆葉際和根際微生物進(jìn)行PCR鑒定，結(jié)果表明PCR鑒定為陽性的8個(gè)野火病菌和7個(gè)角斑病菌接種后產(chǎn)生相應(yīng)癥狀，且PCR擴(kuò)增結(jié)果與接種致病性相一致，證實(shí)該分子鑒定方法有效、可靠。3.煙草野火病、角斑病快速檢測方法的建立通過對病斑研磨液直接進(jìn)行菌體PCR擴(kuò)增，并設(shè)計(jì)多重PCR體系進(jìn)行優(yōu)化，建立了可同時(shí)檢測煙草野火病、角斑病病原菌的快速鑒定方法。4.建立PCR技術(shù)進(jìn)行煙草野火病、角斑病病原菌純化方法利用野火病、